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實時熒光定量技術服務
— 華夏遠洋明星產品
*部分、背景知識
實時熒光定量PCR（Real-time PCR）即通過熒光染料或熒光標記的特異性探針對PCR反應過程進行實時監測，根據PCR指數擴增期間熒光信號的變化來即時測定對應特異產物的含量，并據此推斷目的基因的初始量。該方法可以檢測細胞、組織或微生物中基因表達變化，比較不同組織的mRNA表達差異。如不同藥物濃度處理后相關基因表達水平高低變化；驗證基因芯片結果；siRNA干擾的實驗結果等。與常規PCR（RT-PCR）相比，實時熒光定量PCR具有*的靈敏度、高度的重復性和的特異性。因為PCR擴增過程閉蓋操作，避免了反應產物的污染，大大提高了結果的可靠性，現已成為現階段*的核酸分子定量檢測的金標準，在基因表達研究和臨床疾病檢測等領域已得到廣泛應用。
第二部分、為何稱之為明星產品？
服務：
一、 實驗設備：所用熒光定量PCR儀為伯樂（BIO-RAD）公司儀器；
二、 試劑耗材配備：所用試劑為SYBR Green I 的升級替代產品Eva Green，*白色低腰八聯排管；
三、 論文發表標準：論文可發表在國外任何影響因子的刊物上；
四、 參觀學習：實驗中，客戶可以隨時來參觀學習詢問；
五、 實驗要求：根據客戶要求每個反應免費重復2-3次。樣本在60個以上，基因3個或以上（含內參），RNA提取和反轉錄項目免費。
第三部分、技術流程
1、RNA的提取；
2、DNase I 消化RNA中殘留的DNA；
3、瓊脂糖凝膠電泳，判斷RNA的質量；
4、RNA反轉錄為cDNA；
5、引物設計、合成、驗證，反應體系和反應條件優化；
6、上機檢測：包括擴增曲線、溶解曲線；
7、數據整理、表達量計算、作圖；
8、實驗報告的書寫，包括詳細的儀器、耗材、試劑、引物信息、反應體系、實驗條件、實驗圖片、實驗數據及結果分析。
第四部分、送樣要求
細胞（≥106）、組織（≥100mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA或總RNA（體積≥20μl，濃度≥50 ng/μl）。外地客戶可以干冰郵寄，北京客戶直接公司專員取樣。
第五部分、背景資料
客戶提供物種信息、GeneBank號、目的基因名稱或特異基因的序列。
第六部分、提供結果
實驗所用所有儀器試劑及耗材、引物序列；RNA電泳圖和PCR特異性電泳圖；詳細的實驗過程；原始數據（包括擴增曲線和熔解曲線）及數據分析結果。
第七部分、服務內容、報價、周期
| 服務編號 | 服務項目 | 實驗說明 | 價格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取、DNase I消化殘留的DNA、RNA電泳 | 100元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-R2 | 反轉錄 | 反轉錄、內參基因測試 | 80元/樣品 （樣品大于30個半價） | 2-6個工作日 |
| HX-T1 | 探針合成 | 探針設計、合成、驗證 | 2000元/基因 | 5-10個工作日 |
| HX-S1 | 相對定量-染料法 | 引物設計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復，數據分析。 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S2 | 相對定量-TaqMan探針法 | 引物設計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復，數據分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S3 | 定量染料法 | 引物設計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復，數據分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-S4 | 定量TaqMan探針法 | 引物設計、合成、驗證、上機檢測、3次實驗重復，數據分析 | 180元/基因·樣本 （10個樣品以上起做） | 5-15個工作日 |
| HX-05 | 構建標準品 | PCR擴增、純化、OD值檢測、濃度計算 | 600元/基因 | 2-6個工作日 |
| HX-06 | 標準曲線 | 制作標準曲線 | 800元/基因 | 2-6個工作日 |
【收款方式：本公司所有科研服務均收取60%預付款，實驗完成后，1個月內結清尾款。具體優惠方式和細節歡迎您來信或。】
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北京華夏遠洋科技有限公司
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電子郵件：huaxiabio
華夏遠洋生物商城：www.華夏遠洋.com www.huaxiatech.com.cn www.huaxiatech.cn
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