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試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被活性氧抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品活性。
| 實驗原理 |
| 酶聯免疫吸附實驗（ELIAS)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等有點。 |
| 標本要求 |
| 1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。馬上進行實驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。 |
| 2.不能檢測含NAN3的樣品，因NAN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 |
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