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DiR _ MedChemExpress (MCE)

來源:MedChemExpress LLC   2024年04月01日 10:11  

DiR

MCE 國際站:DiR

CAS:100068-60-8

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲條件:4°C, sealed storage, away from moisture and light

生物活性: DiR (Cy7 DiC18) 是一種親脂性近紅外熒光花青染料,用于染色膜。

體外:羰花青染料廣泛用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括 DiO (DiOC18 (3))、DiI (DiIC18 (3))、DiD (DiIC18 (5)) 和 DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料 DiA (4-Di-16-ASP) 用于標記膜和其他疏水結構。DiIC16 (3) 具有比 DiI (C18) 更短的烷基取代基 (C16)。它們在脂質環境中具有ji高的消光系數、環境依賴性熒光和短的激發態壽命。它們在室溫下是油狀物,在水中發出微弱熒光,但當摻入膜中或與親脂性生物分子結合時,它們發出高熒光且相當耐光。這些光學特性使它們成為細胞質膜染色的理想選擇。一旦應用于細胞,這些染料就會在質膜內橫向擴散,導致整個細胞染色[1]。 DiO、DiI、DiD 和 DiR 呈現出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光,從而促進活細胞的多色成像和流式細胞術分析。DiO 和 DiI 可分別與標準 FITC 和 TRITC 過濾器一起使用。其中 DiI 及其類似物是zui常用的,因為它們通常表現出非常低的細胞毒性。此外,DiI 廣泛用于測定 LDL 和 HDL 等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料 DiA 也常用于神經元示蹤[2]。 一般方案1. 制備 Di 染色液 a. 制備 DMF、DMSO 或乙醇儲備溶液:儲備溶液應在二甲基甲酰胺 (DMF)、二甲基亞砜 (DMSO 或乙醇 DMSO 中配制,濃度為 1-5 mM。作為 Di 的溶劑,DMF 優于乙醇。儲備溶液應任何未使用的溶液需要等分并重新冷凍至少 -20℃。避免反復冷凍/解凍循環。溶液可儲存 6 個月。b. 準備工作溶液:將儲備溶液稀釋到合適的緩沖液如無血清培養基、HBSS 或 PBS 配制成 1 至 5 μM 的工作液。我們不建議將水溶液存放超過一天。注意:工作液的最終濃度2. 懸浮細胞a. 1000 g 4℃離心 3-5 分鐘,棄上清,PBS洗2次,每次5分鐘。細胞密度為 1×106/mL。b. 加入 1 mL Di 工作液,室溫孵育5-30分鐘。C. 4℃,400g離心3-4分鐘,棄上清。d.用PBS洗滌2次,每次5分鐘。e.用無血清細胞培養基或PBS重懸細胞,熒光顯微鏡或流式細胞術觀察。3.貼壁細胞a.在無菌蓋玻片上培養貼壁細胞。b.從培養基上取下蓋玻片并吸出多余的培養基。c.加入100 μL工作液,輕搖使之wan全覆蓋細胞,室溫孵育5-30分鐘。d.用培養基洗兩次,每次5分鐘。通過熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

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研究領域:Others

作用靶點:Fluorescent Dye

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參考文獻:

[1]. Gan WB, et al. Multicolor "DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic dye combinations. Neuron. 2000 Aug;27(2):219-25.[2]. Swift MJ, et al. Applied electric fields accelerate the diffusion rate and increase the diffusion distance of DiI in fixed tissue. J Neurosci Methods. 2005 Jan 30;141(1):155-63.

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