細胞培養過程中,培養基的顏色變化往往對應著細胞狀態。大多數情況下,1640培養基都呈紅色,這是因為細胞培養基的PH值大多在7.4左右,添加了酚紅的培養基的顏色就是紅色。那么你知道1640培養基為什么會變色嗎?讓我們一起來看看吧!
不同成分培養基的顏色會有差異,例如DMEM會比1640顏色深一點,主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導致。當然還有部分培養基不含有酚紅,呈現的就是無色或者淡黃色。
開封了一段時間后的1640培養基,顏色會比正常深很多。主要是因為培養基所用的緩沖體系為NaHCO3,培養基開封后NaHCO3會分解成CO2溢出,導致培養基偏堿;可以將培養瓶擰松放置于CO2培養箱中一段時間后,培養基顏色會變正常。
通常培養基里的酚紅指示劑遇酸會變黃,但也有可能是細胞被污染而導致的培養基顏色變黃,以下為幾種常見情況:
1. 由于細胞代謝產酸,培養了細胞后的培養基會從紅變黃,如果培養基是橘黃色,則是細胞健康生長的顏色,無須擔心,繼續培養即可。
2. 若細胞狀態良好,但換液后培養基顏色變黃快,則可能是因為細胞密度大或消耗過大,提示需要傳代了。
3. 若細胞狀態差,生長異常,培養基很快變黃,變渾濁,鏡下觀察有較多小顆粒物,則有可能是細菌污染或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,重度污染建議消殺后丟棄。
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