【瑞士步琦】突破復雜天然產物研發瓶頸——Sepbox 2D-2000二維色譜純化系統
突破復雜天然產物研發瓶頸
人類用天然產物提取物治療疾病的歷史已有數千年,其中廣為人知的就是中藥。隨著科學水平的發展,中藥被現代藥理學和臨床試驗證實有效,然而中藥的生物活性成分與治療機制任未被廣泛理解。因此從包括中藥在內的天然產物中提取高純度的目標成分單體或有效成分群,隨后對其物化性質、化學結構及生物活性等進行研究也一直是現代天然產物研究的重要課題。
在研究天然產物的過程種,我們可以利用一系列儀器縮短樣品的萃取和準備時間,比如步琦的 R-220 Pro Extraction。但是在獲取高純度的先導化合物時,往往需要花費幾周甚至幾個月去純化分離。 這個過程包括了粗分富集(中壓色譜或敞口柱),餾分處理以及高壓高純度純化。
▲傳統天然產物純化方式
自 2022 年 8 月瑞士步琦公司收購德國 Sepiatec 之后,其擁有 Sepbox 2D-2000 二維色譜純化系統也被合并入步琦的色譜產品線中。Sepbox 2D-2000 二維色譜純化系統主要適用于復雜天然產物提取物(例如中藥、海洋生物和微生物等)的全自動純化分離,整合了紫外(UV)和蒸發光散射(ELSD)檢測器,為突破天然產物分離的瓶頸提供快速有效的工具。
▲Sepbox 2D-2000 二維色譜純化系統
傳統方法需要幾周甚至幾個月才能完成的工作,在經過 Sepbox 2D-2000 加速后,只需幾天甚至 1 天就可以完成。
▲Sepbox 2D-2000 可大幅縮短天然產物純化時間
Sepbox 2D-2000 可以在一天內純化收集多達 576 個餾分,其中 20%-30% 的餾分純度可以達到 90% 至 99% (ELSD下)。
▲Sepbox 2D-2000 可獲得 90% 至 99% 純度的化合物
有別于傳統 HPLC x HPLC 二維色譜系統,Sepbox 2D-2000 采用zhuan li技術結合 HPLC 和 SPE(固相萃取),組成 HPLC-SPE-HPLC 的二維色譜分離系統。
▲Sepbox 2D-2000 系統流路
系統由 1 根一級分離柱,18 根 SPE 捕獲柱與 6 根二級分離柱組成。樣品在從一級分離柱進入 SPE 捕獲柱前,會通過補水泵增加樣品極性,使其保留在捕獲柱內。捕獲柱與分離柱內有 C4、C18、氨基以及離子交換等數種不同的填料構成,可以涵蓋幾乎所有極性和非極性樣品。通過 13 組電磁閥門控制,樣品可以按照既定的程序進入對應的色譜柱內,實現全自動分離復雜樣品的目的。
Sepbox 2D-2000 二維色譜純化系統
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梯度溶劑泵 100 mL/min,最大壓力 400bar ,支持三元梯度
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補水泵 100 mL/min,最大壓力 400bar
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一級分離柱1根:150 x 32 mm, 二級分離柱6根:250 x 16 mm
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18 根 SPE 捕獲柱:30 x 32 mm
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支持最大 2000mg 的干法或液體進樣,含一根干法上樣柱
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紫外檢測器 190-750nm, 標配 ELSD 檢測器
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支持 576 組,每組 60mL 餾分收集
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尺寸:266 x 65 x 89 cm (W x D x H)
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