特色方案
食品中維生素B12的測定
維生素B12又叫鈷胺素,是含有必須礦物質的維生素,廣泛存在于動物食品中。維生素B12參與制造骨髓紅細胞,具有防止惡性貧血的作用。消化道疾病者容易缺乏維生素B12,應當注意飲食平衡,并適當口服維生素B12予以補充。SHIMSEN 維生素B12免疫親和柱能夠特異地富集樣品中的維生素B12,廣泛應用于乳制品、嬰兒配方奶粉及飲料等食品樣品的前處理步驟。
1. 提取
維生素B12標準品:
380-04112-S,Vitamin B12
維生素B12同位素內標:
380-04412-IS,[13C7]-Vitamin B12
準確稱取混合均勻的樣品2.0 g(精確至0.01g)于50 mL離心管中,加入20 mL去離子水溶液,渦旋10 min,
超聲15 min。于8000 r/min下離心10 min,移取4 mL上清液,待凈化。
2. 凈化
SHIMSEN 維生素B12免疫親和柱,1000ng/3mL(貨號:380-00930-03)
(1)活化:加壓排出免疫親和柱中的保護液,棄去流出液;
(2)上樣:準確移取上清液4 mL加入免疫親和柱中,棄去流出液;
(3)清洗:當上樣液的液面下降到免疫親和柱中的管體處時(未全流干時),向柱中加入10 mL水,棄去流出液,于負壓裝置(貨號:RT-26077)中將小柱抽干;
(4)洗脫:關閉負壓裝置閥門,向柱中加入2 mL甲醇,靜置2-3 min,打開閥門,收集流出液。
(5)重新溶解:向洗脫液中加入50 µL 0.1%甲酸水,于50-60℃氮吹至近干;再加入1 mL 0.1%甲酸水渦旋混勻,過0.22 µm尼龍濾膜(貨號:380-00321),待檢測。
注意:
① 實驗中應控制柱流速不要超過1 mL/min;
② 免疫親和柱于2-8 ℃儲存,不可冷凍,使用前需要恢復到室溫。
附:參考方法
食品中維生素B12的測定 參考標準GB 5009.285-2022 第二法
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