血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產量低,成本高。
應如何為你的細胞選購FBS呢?選購FBS應考慮哪些標準?
1、血源可追溯性
選擇來源安全、可追溯的FBS對于細胞培養來說至關重要。目前市面上存在較多以假亂真的FBS產品,科研工作者對血清的真實產地、來源難以鑒別。對此,國際血清行業協會(ISIA)實施了供應鏈可追溯性的行業標準,以確保FBS的質量和安全性。例如,FBS供應商是否保留原產地的可追溯記錄?是否持有血清生產各階段處理、運輸和商業交易的文件?這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。
2、產品檢測
每款FBS在生產上市之前,必須經過嚴格的質控檢測。
質控環節不可少,以確保上市的血清符合規定合乎規格,而血清產品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現。在COA中,常規的檢測指標包括內毒素、總蛋白、細菌、病毒等,例如我國藥典規定,FBS中內毒素含量應≤10EU/mL,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。
3、質量驗證
我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質量,即培養細胞的效果進行鑒定了,而這也是決定細胞能否養好的關鍵。
在細胞培養過程,質量粗糙的FBS可能會導致細胞出現生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現象,從而導致實驗受阻。經過質量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養效果,進而判斷其能否把自己的細胞養好。對于質量優質的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養驗證,若培養效果良好,則其他常規細胞系的培養就更不在話下。
4、穩定性
FBS作為其他行業的副產品,其生產在本質上會受到天氣、食物供應、經濟條件和牛群規模及疫情等各種因素的影響,導致血清的供應可能出現貨源、價格及批次間的不穩定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內外已有多個實驗室出現過因血清批間差異大而導致實驗結果無法重復的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。
因此,找到穩定提供同批次FBS的供應商,對于確保自己細胞實驗結果的真實性和可重復性具有重要意義,而且花在重復實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。
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