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凝膠滲透色譜(GPC)的分離原理和優(yōu)點介紹

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2022年08月22日 09:27  
凝膠滲透色譜(GPC)測試用于檢測高分子材料的分子量及分布,分析材料的各組分含量。凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布,同時根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離脂溶性和水溶性物質(zhì),分離相對分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下。
 
分離原理:
 
凝膠具有化學(xué)惰性,它不具有吸附、分配和離子交換作用。讓被測量的高聚物溶液通過一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱,柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙(較大)和粒子內(nèi)的通孔(較小)。當(dāng)聚合物溶液流經(jīng)色譜柱(凝膠顆粒)時,較大的分子(體積大于凝膠孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能從粒子間的間隙通過,速率較快;而較小的分子可以進入粒子中的小孔,通過的速率要慢得多;中等體積的分子可以滲入較大的孔隙中,但受到較小孔隙的排阻,介乎上述兩種情況之間。 經(jīng)過一定長度的色譜柱,分子根據(jù)相對分子質(zhì)量被分開,相對分子質(zhì)量大的在前面(即淋洗時間短),相對分子質(zhì)量小的在后面(即淋洗時間長)。自試樣進柱到被淋洗出來,所接受到的淋出液總體積稱為該試樣的淋出體積。 當(dāng)儀器和實驗條件確定后,溶質(zhì)的淋出體積與其分子量有關(guān),分子量愈大,其淋出體積愈小。
 
優(yōu)點:
 
(1)全部組分均在溶劑分子洗脫之前洗脫下來,分離時間短。
(2)可以預(yù)測洗脫時間,可以連續(xù)進樣。
(3)凝膠色譜的分離過程不依靠分子間作用力,一般情況下,沒有強保留的分子累積在色譜柱,所以分離時試樣組分不會丟失,柱的使用壽命也會延長。
(4)保留時間短,色譜峰窄,容易檢測。

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