角分辨散射儀是以特定頻率入射光照射這些粒子,它們不吸收入射光能量,而僅作為二次波源向各個方向發射與入射光頻率相同的球面散射光,這種沒有頻率位移(即無能量變化)的散射稱為彈性光散射(elastic light scattering),也常稱為經典光散射(classical light scattering)、靜態光散射(static light scattering)在靜態光散射情況下,通常用來表征一個體系的散射能力和角度依賴性。
角分辨散射儀譜操作規程:
1、開機前準備:水:蒸餾水,有機溶劑:色譜純。緩沖鹽溶液:配置完成后過2層0.22um濾膜。流動相需準備充足。
2、系統平衡:根據需要選擇凝膠柱以及需要連接的檢測器。開啟脫氣機,泵、柱溫箱、檢測器以及電腦開關。點擊quick start pump進行流速設置,點擊ASTRA進行實驗方法設置。提前24小時將流速調至試驗所需流速進行系統平衡,其中注意流動相過渡問題,待檢測器沖平后可進行進樣分析。
3、進樣:建議標準樣品歸一化處理,用于激光18角度校正,建議進樣前進行該處理。多糖需用3-5mg/mL分子量為五萬以下的右旋糖酐進行激光,蛋白質以2-4mg/mL的BSA作為歸一化樣品。所以樣品離心后取上層清液過0.45um濾膜。手動進樣器扳至load狀態進行進樣,一般需進3-5倍進樣環體積以清洗進樣環,點擊軟件中運行后將進樣器扳至Inject狀態進行數據采集。
4、數據分析:數據采集后需進行定基線、峰等數據處理,依據實驗需要提前實驗數據。所有數據可以通過圖表中郵件中edit進行數據導出。
5、關機:色譜柱和系統清洗-流動相沖洗2-3個小時,根據流動相性質選擇合適溶劑過渡,如緩沖鹽流動相沖洗后需用萬分之二疊代鈉清洗一晚上后換20%甲醇沖洗足夠時間后,進行色譜柱保存,關閉儀器電源。實驗完成后做好登記工作。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。