分享轉染小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3)siRNA文章(IF10.588)
轉染小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3)siRNA文章(IF10.588) 編輯
一、 轉染小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3),轉染siRNA文章概述:
當NIH/3T3細胞生長密度達到60%,在不含FBS培養基的六孔板中進行轉染。對于細胞轉染使用5μM pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11,siALKBH5,miR-21a-5p mimic,miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic和相應對照,使用 Advanced DNA/RNA轉染試劑(#AD600025 Zeta life, USA) 對細胞轉染;在轉染24小時后分別對TRIM11或ALKBH5通過蛋白質印跡或qPCR檢測敲低效率。
二、其它
1、NIH/3T3細胞培養條件:文章選擇Z7181FBS-500胎牛血清培養(# Zeta life, USA)
2、文章作者:河北醫科大學公共衛生學院毒理學教研室、河北醫科大學環境與健康重點實驗室
3、標題:FcγRIIB The proteasome-dependent degradation of ALKBH5 regulates ECM deposition in PM2.5 exposure-induced pulmonary fibrosis of mice .(IF10.588)
轉染小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3)siRNA文章(IF10.588)編輯
三、轉染轉染NIH-3T3細胞原文
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Cell transfection
Transfection was conducted when NIH/3T3 cells grown to 60% density in six-well plates with FBS absent medium. For cell transfection, 5 μM of pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11, siALKBH5, miR-21a-5p mimic, miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic and cor-responding control (Genepharma, Shanghai, China) was transfected into cells using Advanced DNA/RNA Transfection Reagent (Zeta life, USA) according to the supplier’s guidelines, respectively. TRIM11 or ALKBH5 knockdown efficiency was detected by western blotting or qPCR after 24 h post-transfection, respectively.
四、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區聯合開發用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。
五、文章中所使用轉染試劑產品信息
產品名稱
Advanced DNA RNA 轉染試劑
貨號
AD600025、AD600050、AD600075、AD600150
規格
0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML
安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。致力成為推動生命科學進步和值得信賴的合作者。
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