手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
細(xì)胞凍存的程序降溫盒的使用注意事項(xiàng)
細(xì)胞凍存有兩種方法：傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4℃、-20℃、-80℃保存，程序降溫方法是利用程序降溫盒設(shè)定程序由室溫降低至-80℃，最后再放置到液氮槽中長期保存。程序降溫盒的使用注意事項(xiàng)如下：
實(shí)驗(yàn)室雖然有程序降溫凍存盒，但怎么使用一直都搞不明白，我覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時(shí)間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時(shí)候就是室溫)，然后把細(xì)胞放進(jìn)去，再一起移到-80度，這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢?時(shí)間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用時(shí)間長了會(huì)不會(huì)揮發(fā)或變質(zhì)什么的，要不要添加或維護(hù)一下呢，還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分，要補(bǔ)充嗎?
經(jīng)驗(yàn)1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于最底線。
凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進(jìn)去細(xì)胞，置于-80，利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫啊。)
根據(jù)論壇里的討論，異丙醇使用過一段時(shí)間后是要更換的，但是我一直沒換過，也沒發(fā)現(xiàn)很大問題。
經(jīng)驗(yàn)2：我們實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度，需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的，很方便，效果也不錯(cuò)的。
經(jīng)驗(yàn)3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮，效果很不錯(cuò)。異丙醇熔點(diǎn)：-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w。注意了有可燃性!急性毒性：口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激數(shù)據(jù)：眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
經(jīng)驗(yàn)4：應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的，因?yàn)樘荻冉禍氐钠鹗键c(diǎn)是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時(shí)間待其恢復(fù)到室溫再使用。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達(dá)到刻度線，否則降溫效果會(huì)受到影響。
經(jīng)驗(yàn)5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理論上是5次以后更換異丙醇，但是異丙醇對環(huán)境有害，我們可以多用幾次，只是少了的時(shí)候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細(xì)胞有毒性，尤其是室溫的時(shí)候，所以凍存盒和凍存液先放4°，等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里，還放回4°，等到出細(xì)胞間的時(shí)候再拿到-80°里面保存。過夜再轉(zhuǎn)入液氮。
程序降溫盒這個(gè)梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率，由于程序降溫盒內(nèi)存在*濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯，因此程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心