凝膠成像儀是一款用于電泳結束后對凝膠譜帶的觀察、拍攝和分析的儀器。主要用于蛋白質、核酸凝膠成像及分析,系統提供白光和紫外光以及藍光光源進行拍攝凝膠,由系統自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統自帶的圖像分析軟件對拍攝的圖像進行分析。
使用凝膠成像儀時,需要按正確的步驟來操作,避免因不恰當操作而造成的儀器損壞。操作步驟如下:
在初次使用,都是按正常的流程打開凝膠成像儀電源開關,打開電腦,并進入成像軟件。根據自己的實際需求,選擇雙擊桌面的圖表軟件,按流程操作。
1、ECL拍攝
將拍攝模式切換為“ECL模式”,將濾光輪轉到ECL位。選擇合適拍攝分辨率(有像素合并功能的機器都有這個功能),點擊“啟動”。將樣品放置在樣品臺正中間,調整鏡頭的焦距使樣品占據窗口約80%左右,然后點擊“自動曝光”,勾掉“負片”并調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰.(光圈越大,自動曝光所需時間越短。)并先用單幀拍攝,拍攝一張Mark照片。關閉反射白光后給放置在化學發光成像板上的纖維素膜均勻加上發光液。將拍攝方式設置為“規則積分”,勾上“負片”,并設置的時間和張數,點擊“拍攝”按鈕即可。
2、普通凝膠拍攝
(1)將拍攝模式切換為“普通模式”,凝膠成像儀,將濾光輪轉到UV位(無綠光鏡輪的無需調整)。
(2)選擇合適拍攝分辨率(機器有像素合并功能),點擊“啟動”。
(3)DNA膠拍攝:將DNA膠放置在紫外臺正中間,調整焦距使樣品占據窗口約80%左右,然后點擊“自動曝光”,并調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰.然后關閉反射白光,開啟透射紫外,并微調,確保在紫外下處于清晰狀態。
(4)蛋白質膠拍攝:將蛋白質膠放在拆疊白光板的中間,關閉反射白光,開啟透射白光,然后點擊“自動曝光”,并調整聚焦使預覽窗口中的樣品圖像清晰。
(5)在軟件界面點擊“拍攝”按鈕即可。
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