常見分光光度計分類、用途及使用注意事項
一、常見分光光度計及其用途
(1)可見分光光度計
用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外可見分光光度計
紫外可見光譜儀用來測量待測物質對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度,紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區別。
單光束:適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩定性。
雙光束:自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結構分析。儀器復雜,價格較高。
假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發出的光被分成兩束,一束直接到達檢測器,另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優點是可以監測光源變化帶來的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物常用的光譜區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣,紅外光譜法的特點是:快速、樣品量少(幾微克~幾毫克),特征性強(各種物質有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器,應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域,通過對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。
(5)原子吸收分光光度計
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規儀器之一,是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
二、分光光度計使用注意事項
(1)分光光度計應放在干燥的房間內,使用時放置在堅固平穩的工作臺上,室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風,防止燈泡燈絲發亮不穩定。
(2)分光光度計使用前,使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理,以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應該對儀器的安全性能進行檢查,電源接線應牢固,通電也要良好,各個調節旋鈕的起始位置應該正確,然后再按通電源開關。
(3)分光光度計在儀器尚未接通電源時,電表指針必須于“0”刻線上,若不是這種情況,則可以用電表上的校正螺絲進行調節。
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