超臨界流體色譜法
以超臨界流體作為流動相的色譜技術被稱為超臨界流體色譜法。雖然超臨界流體色譜法20世紀60年代就出現了,但是直到21世紀才得到成功應用。目前超臨界流體色譜法仍然是較新的色譜分析方法,很多人對它的了解不多,下面就簡單介紹一下它的特點與適用范圍。
超臨界流體色譜法與氣相色譜法以及高效液相色譜法的比較
超臨界流體色譜法主要用于分析可溶的多種化合物;其分離原理為CO2作為流動相通過改變色譜柱、壓力和溫度、添加有機助溶劑來調節分離;分析揮發性化合物時不需要衍生化。
氣相色譜法主要用于分析易揮發、難降解的化合物;其分離原理是通過改變色譜柱、溫度來調節分離;樣品需氣化才能分離,有時需要衍生化。
高效液相色譜法主要用于分析多種可溶的、加熱易降解的化合物;其分離原理是通過改變色譜柱、流動相和溫度來調節分離;有時需要衍生化。
超臨界流體色譜法和氣相色譜法、高效液相色譜法有不同的選擇性,可以和氣相色譜法、高效液相色譜法形成很好的互補。對于復雜體系樣品,超臨界流體色譜法結合其他的色譜分離手段可以更加完整的對樣品進行分析。
超臨界流體色譜法通常是一種正相技術,因為組分按極性由低到高的程序運行。然而超臨界流體色譜法與正相HPLC相比具有顯著的優勢,其平衡速度極快,重現性非常出色,甚至可以進行水性樣品分析。
超臨界流體色譜法的適用范圍
超臨界流體色譜法非常適合用于分離極性很低的化合物,例如許多天然產物。包括脂溶性維生素、脂溶性藥物雜質、類胡蘿卜素和脂質。對于此類樣品,常以C18作為固定相。在脂溶性化合物的分離上基本可以*代替正相色譜,并獲得更佳的分離效果。早期大多數應用使用純CO2、壓力程序和火焰離子化檢測器(FID)。
超臨界流體色譜法是分離各種結構類似物的較好選擇,例如各種手性藥物異構體(包括手性藥物雜質),位置異構體、順反異構體等。
超臨界流體色譜法可以分析揮發性化合物,特別是對于熱不穩定的揮發性化合物,分析揮發性化合物時不需要衍生化,并且可以從分析放大到制備SFC,突破GC不能制備的瓶頸。
超臨界流體色譜法還在藥物代謝產物研究、中藥分析研究等方面獲得廣泛應用。
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