液相色譜柱在選購時需注意哪些問題?
在選擇色譜柱之前,多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對性化合物保留好的色譜柱
2. 如果樣品性太,或酸性太;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+陰離子對試劑或陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較,否 則難重復實驗,另外離子對試劑難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3.如果堿性化合物的性太,或堿性太;可以選擇寬pH的C18色譜柱在pH值檢測(點是方法開發簡單,缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是經典的檢測堿性樣品的方法)選擇離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較,否則難重復實驗)也有使用C18+陰離子對試劑或陰離子交換色譜柱
4. 若樣品是堿性的;可選擇純硅膠柱(純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
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