“在細胞培養的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的瓶皿之中,細胞點點,引無數英雄競掛東南枝。正所謂“萬事開頭難”,即便是細胞復蘇與保存這兩件看似簡單的事情,也能造成實驗汪內心無比巨大的陰影面積。”在2016年10月一篇名為:實驗新人必讀:細胞培養那些事兒。詳細闡述了細胞凍存相關問題。引起了細胞生物學的重視。
在細胞凍存中存在三大問題。一、凍存液的配方;二、凍存的分步降溫;三、凍存液穩定性。
一般的凍存液配方基本具有三要素:培養基、血清、DMSO。培養基的選擇要根據細胞種類。血清大多采用動物源血清,但血清中未知成分和感染物質會給凍存帶來影響與風險。DMSO在細胞凍存中要保持在5%~15%范圍內,過少會影響復蘇,過多對細胞有毒性。綜上所述,這么多因素制約著細胞凍存,稍不注意讓您的細胞研究就會變得很“虐心”。
細胞凍存時要嚴格進行梯度降溫(-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮)。要知道冰火兩重天的生活環境只會讓嬌弱的細胞自爆身亡,謹記:緩降溫!但如果真心趕時間時,可以使用細胞凍存盒進行細胞凍存,而后盡快將其轉入液氮中。
凍存液穩定性,無血清的穩定性比含血清穩定性高。與含血清類型相比,批次間的成分組成差異小,可保持穩定的品質。不含血清,因此沒有因動物源的未知成分和感染物質所產生的影響與風險。可對無血清馴化細胞進行冷凍,節省再馴化步驟。
富士膠片和光推出一款無血清細胞凍存液——BAMBANKER®,這款產品是細胞凍存研究的革新,那么它“新”在哪里呢?具有幾大特點,無血清、無需分步降溫,直接使用、無需程序降溫盒,即用型細胞凍存液。完*了上述所有的不良因素。
那么有些讀者要問了,這么優質的凍存液真正在應用方面怎么樣呢?下面一張圖片可以直觀地看到其凍存液的“多樣性”。
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