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如何通過2D細胞培養工作流程進行3D細胞培養?

來源:上海睿玥實驗器材有限公司   2020年08月06日 23:12  

細胞培養是藥物研發、組織工程、毒理學測試、干細胞研究以及基礎研究中的重要工具。在臨床前的藥物研發過程中,單層細胞培養仍然占主導地位。然而,2D培養只能在有限程度上模擬組織生理條件,而體內細胞實際上是在三維網絡中相互作用 的。因此,2D培養產生的結果往往在預測臨床有效性和毒性方面作用有限,導致藥物研發過程中的高損耗率。3D細胞培養使細胞外基質(ECM)組分得以表達,同時能夠形成細胞-細胞、細胞- 基質之間的相互作用。這些特征對于復制體內細胞的分化、增殖和體外功能是非常重要的。球狀體培養被認為是預測性體外篩選實驗的改進方法,其對于臨床前藥物研發具有高度生理相關性,尤其是在癌癥研究和毒理研究中。

在球狀體培養中,細胞在具有細胞異質性、 營養和氧氣梯度的三維系統中生長,以更接近體內腫瘤微環境。球體培養和2D單層培養(例如腫瘤細胞系)相比,會有顯著的功能差異,包括蛋白質表達的改變、磷酸化模式和對抑制劑的響應。Greiner Bio-One開發了具有細胞排斥表面的CELLSTAR®細胞培養產品,用于3D培養。細胞排斥表面有效地防止細胞貼壁,從而可以促進三維球體的自發形成:圓底微孔板每個孔中的單個球狀體或平底板中的多個球狀體。對于高放大倍率下單個球狀體的 顯微鏡分析等應用,Greiner Bio-One還提供磁性3D細胞培養技術,能夠滿足高通量篩選對理想光學 特性的需求。 兩種產品線均可以使您使用快速簡便的2D工作流程實現3D培養!

與能夠增強細胞貼壁的標準組織培養表面相反,細胞排斥表面能有效地防止細胞貼壁。對于半貼壁和貼壁細胞系的懸浮培養,常規的標準疏水表面不足以勝任,而具有細胞排斥表面的CELLSTAR® 細胞培養容器可有效地防止細胞貼壁。自組裝的球形簇可用作3D細胞培養的模型,對于球狀體的形成,細胞-細胞間相互作用必須*于細胞和培養表面之間的相互作用。干細胞聚集體的形成也是如 此,這是多種干細胞培養和分化方案中的關鍵步驟。Greiner Bio-One的細胞排斥表面培養容器為培 養球狀體和干細胞聚集體提供了理想的平臺。在水凝膠中進行長期培養是一種常用的模擬3D環境的方法。當使用常規的組織培養容器進行該方法時,一些細胞傾向于從水凝膠中遷移出來,在容器表面形成2D亞群。對這種細胞群體的分析將導致數據混合有來自2D3D細胞培養物的信息。具有細胞排斥表面的CELLSTAR®細胞培養容器可用于水凝膠培養, 因為這種表面能有效地抑制2D亞群培養物的形成。

同樣,在進行磁性3D細胞培養時,也必須避免將細胞粘附到培養容器的表面。Greiner Bio-OneCELLSTAR®細胞培養產品具有細胞排斥表面,可完美匹配磁性3D細胞培養。細胞排斥的表面特性是通過對容器表面進行創新的化學修飾來實現的。所有具有細胞排斥表面的細胞培養容器都通過輻射(SAL10-3)進行滅 菌,不存在可檢測的內毒素、DNase/RNase和人源DNA,也無細胞毒性作用。細胞毒性的評估是根據EN ISO 10993-5文件用哺乳動物細胞系進行的。與所有Greiner Bio-One微孔板一樣,細胞排斥表面的微孔板的制造尺寸符合美國國家標準協會(ANSI 1-2004)的建議,以保證與所有通用型實驗室設備的兼容性。總之,Greiner Bio-One細胞排斥表面的細胞培養產品為培養半貼壁和貼壁細胞系、懸浮培養、干細胞聚集以及球狀體的形成提供了理想的平臺。

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