線粒體是細(xì)胞生物氧化產(chǎn)生能量的重要場(chǎng)所，是存在于細(xì)胞核外且攜帶遺傳物質(zhì)DNA的細(xì)胞器。線粒體內(nèi)存在的遺傳物質(zhì)為線粒體DNA（mitochondrial DNA，mtDNA），位于線粒體腔內(nèi)接近內(nèi)膜，是產(chǎn)生氧自由基、發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化的主要部位^[1,2]。由于mtDNA缺乏組蛋白保護(hù)和相關(guān)的DNA修復(fù)酶，使mtDNA比細(xì)胞核DNA更易受到活性氧自由基的攻擊。而mtDNA功能障礙直接影響線粒體氧化磷酸化，導(dǎo)致ATP產(chǎn)生障礙和氧化磷酸化功能異常，進(jìn)而導(dǎo)致全身多個(gè)器官功能障礙^[3]。

隨著線粒體醫(yī)學(xué)的發(fā)展，線粒體病的臨床譜系不斷擴(kuò)大，中國(guó)常見(jiàn)的線粒體病臨床亞型包括：如圖所示^[4]

線粒體病是一組由線粒體基因或核基因突變導(dǎo)致的代謝性、多系統(tǒng)受累的疾病^[5]。其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，診斷較為困難。目前，臨床多應(yīng)用骨骼肌活檢的方法在細(xì)胞和蛋白水平對(duì)該組疾病進(jìn)行診斷。

由于肌肉及腦組織內(nèi)線粒體含量豐富，且對(duì)能量的需求大，故線粒體疾病主要表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)線粒體疾病。臨床上多以神經(jīng)肌肉系統(tǒng)為主，線粒體腦肌?。╩itochondrial encephalomyopathy，ME）為線粒體DNA或核DNA缺陷導(dǎo)致線粒體結(jié)構(gòu)和功能障礙，引起機(jī)體能量代謝紊亂的母系遺傳病，可同時(shí)累及骨骼肌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)^[1]。在線粒體腦肌病中病變部位血管平滑肌、內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)大量異常線粒體堆積，AMA表達(dá)增高，有助于線粒體腦肌病的診斷。MELAS綜合征是線粒體腦肌病比較常見(jiàn)的一個(gè)類型。

圖1,2 MELAS患者肌肉活體組織檢查 AMA免疫組織化學(xué)染色，可見(jiàn)到不整棕褐色肌纖維 圖1 x200；圖2 x400

圖3 非線粒體疾病患者對(duì)照肌肉活體組織檢查，可見(jiàn)到斑點(diǎn)狀分布的陽(yáng)性物質(zhì) AMA免疫組織化學(xué)染色 x400

普通光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)MELAS患者骨骼肌AMA免疫組織化學(xué)染色可見(jiàn)大量不整棕褐色肌纖維(ragged brown fibers,RBF)，其形態(tài)類似MGT染色下的不整紅邊纖維(ragged red fibers,RRF)，而對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)RBF。文中指出AMA免疫組織化學(xué)下的RBF是線粒體異常增生的特異性表現(xiàn)，同MGT染色下的RRF類似，可以作為診斷線粒體病異常線粒體的病理學(xué)指標(biāo)^[6]。

圖1 腦活檢可見(jiàn)皮層內(nèi)分層樣壞死及小血管增生（例1）HE X400

圖2 腦活檢病理可見(jiàn)皮層內(nèi)及蛛網(wǎng)膜下腔小血管增生，血管壁可見(jiàn)棕褐色沉積物（例2）AMA X400

圖3 腦活檢病理可見(jiàn)皮層內(nèi)小血管增生，血管壁可見(jiàn)棕褐色沉積物（例2）AMA X1000

圖4 腦活檢病理皮層內(nèi)神經(jīng)元可見(jiàn)棕褐色沉積物（例3）AMA X400

MELAS綜合征患者AMA免疫組化染色的主要病理特點(diǎn)是病變部位血管異常增生，提示病變部位血管平滑肌、內(nèi)皮細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)大量異常線粒體堆積，與電鏡下發(fā)現(xiàn)大量異常線粒體堆積對(duì)線粒體腦肌病的診斷有同樣價(jià)值^[7]。

綜上所述，AMA的免疫組織化學(xué)染色可以作為診斷線粒體疾病的一種方法。

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