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甘草提取物檢測方法

來源:南京本草益康生物科技有限公司   2020年03月25日 15:38  

 ※GRAVIMETER重量法:傳統測定甘草酸含量的方法是根據甘草酸遇酸沉淀或酸堿反應的理化性質采取重量法或滴定法測定。重量法是將甘草酸提取液進行過濾,加入濃鹽酸或硫酸,使甘草酸沉淀析出,過濾烘干后精密稱量,即得到樣品中含有的甘草酸質量。重量法測甘草酸:取本品約6g,精密稱定,加水50ml溶解后,移至100mI量瓶中,用乙醇稀釋至刻度,混勻,靜置12小時,精密吸取上清液25ml置燒杯中,加氨試液3滴,置水浴上蒸發至稠膏狀,加水30ml使溶解,緩緩加入鹽酸溶液(3→10)5mI,在冰水中靜置約30分鐘,濾過,沉淀用冰水洗滌4次,每次5ml,棄去洗液及濾液,沉淀在濾紙上放置約2~3小時,使水分自然揮散,再用預先加熱至60~70℃的乙醇10ml使沉淀溶解,濾過,濾器用熱乙醇洗滌至洗液無色,合并乙醇液,置已干燥至恒重的燒杯中,在水浴上蒸干,并在105℃干燥3小時,精密稱定,計算供試品中甘草酸的含量,即得。本品含甘草酸不得少于20.0%
    ※HPLC液相檢測方法:(1)色譜條件。色譜柱為Diamonsil(鉆石)C18(250mm×4.6mm),粒度5μm,流動相:甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(61∶39∶1),柱溫:25℃,流速:1ml/min,檢測波長:250nm;(2)對照品溶液的制備。精密稱取甘草酸單銨鹽對照品 適量,加流動相制成每1ml含0.2mg的溶液(折合甘草酸為 0.1959mg),即得;(3)供試品溶液的制備。取甘草提取物樣品0.1g,精密 稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入流動相25ml,稱定重量,超聲處理20min,取出,放冷,再稱定重量,用流動相補足減失重量,搖勻,濾過,即得;(4)標準曲線的制備。精密吸取甘草酸單銨鹽對照品液(0.2172mg/ml)2、6、10、14、18μl分別注入液相色譜儀,記錄 色譜,以峰面積(A)對質量數(C)進行線性回歸計算;(5)精密度試驗。分別精密吸取供試品溶液10μl,重復進樣5次,按正文所述色譜條件測定,記錄色譜,計算;(6)重現性試驗。取樣品按供試品溶液制備方法制備5 份供試品溶液,分別精密吸取供試品溶液10μl進樣,記錄色譜,計算;(7)加樣回收率試驗。準確稱取已知含量的樣品0.05g;(8)空白試驗。按處方比例及生產制備方法,按供試品溶液制備項下制備陰性溶液,進樣10μl,記錄色譜圖;(9)測定法。分別精密量取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測得

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