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做小鼠免疫球蛋白M實驗中,需要注意什么?

來源:上海瑞番生物科技有限公司   2020年03月16日 17:35  

小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯免疫分析

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:0.1ng/ml - 4ng/ml

使用目的:

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白 M(IgM)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)水平。用純化的抗原包

被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白 M(IgM),再與 HRP 標記

的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB

HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中

的免疫球蛋白 M(IgM)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標

準曲線計算樣品中小鼠免疫球蛋白 M(IgM)濃度。

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出

標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD

值大于標準品孔D一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,

計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 個月

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