瓊脂凝膠擴散試驗(AGP)診斷禽流感
點擊次數:3 發布時間:2011-3-24
AGP是在瓊脂凝膠中進行的抗原-抗體免疫沉淀反應,主要用于病毒抗原型特異性鑒定,即用已知陽性血清和未知抗原進行AGP試驗。AGP是用來檢測A屬(型)流感病毒特異性血清抗體,即抗RNA-核蛋白(即RNP)和基質蛋白(M1)抗體,因而適用于鑒定流感病毒。1970年Beard將AGP用于禽流感Ab的檢測。
該法優點是簡便快捷,特異性強,不受病毒亞型限制,缺點是靈敏性較低。
目前AGP法中zui常用的是免疫雙擴散,與普通AGP法相比,不僅提高了其敏感度,且快速省時,以此法為獲得了良好的結果。Ag制備:感染雞胚尿囊膜磨碎,反復凍融或超聲裂解,然后低速離心,上清滅活即可。1987年,我國學者報道了用AIV尿囊液經超速離心、濃縮,用福爾馬林滅活制備Ag,效果較好。趙增連等在瓊脂板中加入3%的PECk6000,則AGP的敏感性提高,且快速省時。
免疫單輻射擴散試驗、單輻射溶血試驗、對流免疫電泳等也常用于AIV及其抗體的檢測,但這幾種免疫沉淀試驗都需在凝膠中進行,敏感性較差,對低滴度樣品都會出現假陽性結果,而且AGP所需試劑及Ag、Ab的量較大。所以尋找更敏感的微量、快速的檢測和診斷方法很有必要。
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