糞便中蠕蟲卵顯微鏡檢定定量加藤板
1.做糞樣前請提前至少24小時將玻璃紙浸泡在透明染液中;(非常重要)
2.每份糞樣取3張載玻片進行編號(與待檢糞樣的編號相同)
3.打開待檢糞樣的包裝,將尼龍網至于待檢糞樣上,用塑料刮片輕壓尼龍網片并在其上輕刮,使細糞渣透過尼龍網片的微孔濾出至尼龍網表面;
4.將定量板放在載玻片中部,然后用刮片將網片表面的細糞渣填入定量板的中央孔內,填滿全孔并抹平;
5.小心移去定量板,使糞樣留在載玻片上;
6.取一張浸泡好的親水玻璃紙,抖掉多余的浸泡液,蓋在糞樣上,用另外一塊較厚的載玻片覆于玻璃紙上垂直均勻用力壓制,使糞便均勻地展開于玻璃紙下;
7.將制作好的加藤片置于樣本盒內(內墊吸水紙,加樟腦丸),并置于室溫下透明過夜待檢(建議隔夜放置12小時以上);如冬季室溫達不到25℃時,可將加藤片置于25℃恒溫箱內以加快透明,以待觀察結果。
結果判讀:
若結果定性,只需記錄觀察到的蠕蟲卵種類;若結果需定量,需要分別記錄所觀察的蠕蟲卵種類,并需要計算出每克糞便中的蟲卵數(Per Gram Egg,EPG),計算公式:單張加藤片蠕蟲卵的平均數×24。隔夜透明的加藤片往往不易觀察到鉤蟲卵(鉤蟲卵一般在透明2小時內可以觀察到)。
四、注意事項
1.使用前按說明書清點核對試劑和材料是否完整。
2.試劑盒在常溫下運輸與保存,有效期2年以上,長期保存透明染液宜放置4℃保存。試劑盒使用前需在室溫放置平衡15min。
3.為避免交叉污染,尼龍網、玻璃紙用完后不能重復使用,刮片與定量板重復利用需要按照生物安全規范處理后使用,但不建議重復使用。
4.制作加藤片建議在操作臺上放置1次性桌布,可避免糞便污染臺面,造成生物安全危害。
5.實驗的廢棄物處理嚴格按照有關實驗室生物安全規范進行處置(加84消毒液或75%酒精溶液,或焚燒或掩埋)。
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