液相色譜儀是20世紀60年代末發展起來的分離分析技術,隨著不斷改進和發展,目前已成為重要的應用極為廣泛的化學分離分析手段。
液相色譜是目前應用多的色譜分析方法,液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。液相色譜的流動相通常是各種低沸點溶劑和水溶液。它是影響分離的一個非常重要因素。在實際工作中,流動相的選擇和優化是確定色譜分析的主要工作。下面介紹一下液相色譜儀流動相的選擇方法。
1、由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
2、三倍規則:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中,注意觀察各個峰的分離情況。
3、粗調轉微調:當分離達到一定程度,應將有機溶劑10%的改變量調整為5%,并據此規則逐漸降低調整率,直至各組分的分離情況不再改變。
氣相色譜儀的流動相采用惰性氣體,對組分沒有親和力,不產生相互作用力,僅起運載作用。而液相色譜儀的流動相選用不同極性的液體,選擇余地大,對組分可產生一定親和力,并參與固定相對組分的劇烈競爭,對分離起很大作用,為選擇分離條件提供了極大方便。
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