分光光度計的儀器組成比較簡單,主要部件包括由光源、單色器、吸收池、檢測器以及數據處理及記錄系統等組成,下面本生生物就從這幾點來具體說詳解下:
(1)光源:
分光光度計中光源為儀器提供連續輻射,理想的光源應在整個紫外見光譜區可以發射連續光譜,具有足夠的輻射強度、較好的穩定性、較長的使用命。
由于不同的光源波長范圍不同,因此,在分光光度計中在可見光區和紫外光區要使用不同的光源。目前儀器常用的光源有兩種:鎢絲燈、氫燈或氘燈。在可見光區、近紫外光區和近紅外光區常用鎢絲燈作為光源,波長范圍約為320-500nm。由于鎢燈的能量輸出大約隨工作電壓的四次方而變化,為了使光源穩定,必須嚴格控制電壓。此外,為防止在高溫下工作時,鎢蒸氣不斷在冷的燈泡內壁沉,在鎢燈泡中引入了少量的碘蒸氣,即碘鎢燈,碘鎢燈相對普通鎢燈使用壽命長些。
(2)單色器:
單色器是分光光度計的核心部分,分光光度計儀器的主要光學特和工作特性基本上由單色器決定。它的作用是將光源發出的連續光譜色散成各種三。分光光度計中的單色器是一個完件——棱鏡或光柵外,還有人射和出射狹縫以及一組反鏡。根據工作光譜范圍、色散率、分辨率等性能指標的要求,可分別選用棱鏡或柵分光的單色器,也可采用濾光片分光的單色器等。
(3)吸收池:
吸收池(比色皿)是盛放樣品溶液的容器,具有兩個相互平行、透光、厚度精的平面。主要有石英池和玻璃池兩種。可見光區用玻璃池,紫外光區須采用石英池。
吸收池可能有多種規格,典型的厚度是lcm。此外,每套吸收池的質料、厚度應*相同,以免產生誤差。吸收池上的指紋、油污或壁上的沉積物都會顯著地影響其透光性,因此在使用前務必*清洗。
(4)檢測器:
檢測器是一種光電轉換設備,將透過吸收池的光信號變成可測的電信號顯示出來。常用的有光電池、光電管或光電倍增管。光電倍增管是利用二次電子發射來放大光電流,放大倍數可高達108倍,是目前應用廣泛但價格較高的檢測器。較*儀器有采用二極管陣列作為檢測器。
二極管陣列檢測器不使用出射狹縫,在其位置上放-極管的線性陣列,則分光后不同波長的單色光同時被檢測。曼響應速度快,但靈敏度不如光電倍增管,因后者具有很高的放大倍數。
(5)數據處理及記錄系統:
數據處理及記錄系統包括放大器、A/D轉換單元、微型計算機等,;理和儀器自動控制。
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