今天喆圖小編來講講金針菇多糖提取所需試劑儀器設備:蒸餾水、纖維素酶、無水乙醇、、正丁醇、氯化鈉、三氯一酸、氫氧化鈉 、鼓風干燥箱、濃縮裝置、離心機、真空烘箱、冰箱、色譜柱、冷凍干燥機
操作過程:原料-預處理--酶解--浸提--濃縮--醇析--脫蛋白--干燥--多糖純品--精制--多糖精品
(1)原料 :新鮮金針菇
(2)預處理:新鮮金針菇65°C放入鼓風干燥箱烘干6h制成干品,將金針菇子實體干品粉碎,粉碎粒度為3--5mm,粉碎后裝入容器中加入2倍質量的水,在90-95°C條件下加熱處理10-15min,得到金針菇子實體勻漿
(3)酶解 :向勻漿中加入0.15%的纖維素酶以破壞金針菇子實體的細胞壁,使多糖釋放出,來,酶解溫度40°C ,ph為4,5時間為3h
(4)浸提:向容器中加入20倍樣品質量的水,在100°C,ph6.5的條件下浸提1h,過濾并收集濾液
(5)濃縮 :將濾液在40°C壓力0.2MPa條件下濃縮至原體積是我1/3
(6)醇析 :向濃縮液中加入無水乙醇至乙醇含量為70%,可以看到有沉淀析出,靜置一段時間至沉淀*析出,在離心分離,收集沉淀,并于鼓風干燥箱中烘干得到多糖粗品
(7)純化脫蛋白質 : 將多糖粗品按樣品與氯方-正丁醇(氯方-正丁醇之比為1:0.2)之比為1:0.25復溶并進行充分震蕩,可將游離蛋白變性成為不容性物質,經離心分離去除,此過程通常反復進行5-8次,每次震蕩30min,才能很好的去除蛋白質,除蛋白后的多糖溶液進行真空干燥,即可得到純多糖產品
(8)精制:粗多糖粉末溶于0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中,至于5-8°C低溫保存箱冷置12h,離心棄去沉淀、濾液加入40%的三氯一酸使之達到8%的含量,再置于低溫冰箱中5-8°C冷置12h離心,將沉淀加入0.1mol/L氯化鈉溶液洗脫分離,用硫酸-苯酚跟蹤檢測,收集(收率約為45%)多糖組分的母液,再取母液以0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中和至ph6.5-7.0,然后將上述洗脫液適當濃縮,蒸餾透析后,在用色譜分離純化。用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液洗脫。收集洗脫液的糖樣
(9)精品 : 將此糖樣經減壓濃縮后,冷凍干燥得到的白色粉末狀金針菇多糖精品。
以上內容僅供參考!
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。