常用的c18液相色譜柱,當拿到新的C18柱時應該怎樣進行活化及維護?為什么要這樣做?
新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡。特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。
具體平衡方式也很簡單,多進幾次測試樣品,直到峰面積和保留時間穩定,再進行正式進樣測定。
如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
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