elisa試劑盒的操作需要引起注意的細(xì)節(jié)
elisa試劑盒以固相載體吸附技術(shù)和免疫酶技術(shù)相結(jié)合建立的一種檢測(cè)方法，其操作簡(jiǎn)便，無需特殊設(shè)備，并具有高度的敏感性和準(zhǔn)確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時(shí)間內(nèi)，于國(guó)內(nèi)外均取得了較快的進(jìn)展。
elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳的原因：
1、原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法：請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
2、原因：操作時(shí)間拖太久。
解決辦法：請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。
3、原因：微孔間相互污染。
解決辦法：加樣品時(shí)，請(qǐng)小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
4、原因：標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
解決辦法：請(qǐng)使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
5、原因：添加樣品或elisa試劑盒的操作方法不正確。
解決辦法：加樣品或elisa試劑盒時(shí)，吸頭請(qǐng)勿接觸微孔。
6、原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
解決辦法：請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
elisa試劑盒操作中應(yīng)注意以下四個(gè)方面：
1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng)，因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器，在中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測(cè)中，還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致，對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大，不注意可能會(huì)導(dǎo)致elisa試劑盒錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4．洗滌是elisa試劑盒操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。