微生物、細菌及衛生學潔凈度現場快速檢測的新寵食品、藥監、醫院感控、環境、水質、化妝品及衛生監督、檢測

ATP細菌檢測原理及手段

/手持ATP熒光檢測儀

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ATP熒光法用于細菌檢測原理及儀器試劑ATP(Adenosine Triphosphate)，中文名為腺嘌呤核苷三磷酸，又叫三磷酸腺苷。它普遍存在于細菌等微生物細胞內，ATP是微生物新陳代謝的能量物質。ATP生物發光法是利用ATP試劑中若干組分如熒光素-熒光素酶等與被測樣本反應產生光子，再利用專門研制的熒光檢測儀來捕捉和檢測發光值，由于被測樣本所含細菌等微生物的數量與所含的ATP值、以及ATP值與發光值之間存在一定的函數關系，因此通過檢測發光值即能得到被測標本所含細菌等微生物含量。利用ATP檢測儀配合ATP試劑便可實現熒光法檢測細菌及潔凈度指標。

國內外ATP儀器及試劑

/手持ATP熒光檢測儀

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手持ATP儀比臺式ATP儀更適合現場快速檢測       為了滿足現場快速檢測的需求，ATP熒光檢測儀宜選擇手持ATP熒光檢測儀（也叫手持式ATP熒光檢測儀），而實現流動狀態即時檢測，因為盡管大型的臺式ATP熒光檢測儀在靈敏度方面可能優于手持式ATP儀,但它只能在實驗室狀態下使用，不利于餐飲服務、醫療感控等流動場所現場檢測。國外ATP檢測技術從上世紀90年開始研究，發展至今有了長足的進步和發展       ATP檢測技術實驗結果準確可靠，值得信賴。美國多個專業機構研究了1000個以上的樣品，這種只需十幾秒就能完成檢測的快速檢測法所得實驗結果90%以上與24-48小時標準細菌培養法/平皿法所得結果一致。測試飲用水時，比標準法靈敏度大100倍以上，樣品量只要傳統方法的1/100。本產品測定結果與傳統細菌培養法所得結果相比，相關性高達92-98%。加拿大食品監查協會經過比對實驗后發現，本產品測定結果與標準培養法的相關性是98%。美國FDA推薦使用ATP檢測系統和試劑盒用于牛奶細菌數的快速檢測。首屆中美食品安全及其全程控制研討會暨微生物快速自動檢測技術培訓班也將ATP快速檢測技術作為培訓內容之一。在巴西召開的第11屆世界滅菌大會暨第7屆滅菌與醫院感染控制論壇，與會專家做了ATP方法用于清洗效評價的研究報告，結論是該方法效果和標準培養法基本一致，所以在許多國家“醫用清潔評價”相關標準中，ATP方法被列入作為評價手段之一。通過應用和評估，美國CDC制定的《醫療機構消毒滅菌指南2008》也將ATP方法作為評價內鏡清洗或內鏡處理效果的新方法。

近幾年來國內由于應用需求牽引，優勢單位在研制出了具有自主知識產權的手持ATP 熒光檢測儀和ATP試劑并在多個領域的到成功應用。中國CDC有研究證實，ATP檢測結果與不同濃度的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和血液成直線相關。通過ATP方法對細菌檢測和表面潔凈度檢測的應用和技術評估，ATP熒光檢測儀已成為中國衛生監督和中國食品藥品監督*部門的衛生監督和食品安全相關的檢測設備，被國家用于食品加工、儲存運輸、貿易、餐飲服務以及醫療系統物體表面及操作人員手等表面潔凈度快速測定，并且以發放政府文件的方式要求購買和配備ATP熒光檢測儀和配套試劑，作為衛生監督和食品安全現場快速檢測能力建設的重要舉措。

國內在2005年前后開始進行手持式ATP熒光檢測儀研制，并且研發出*臺手持式ATP熒光檢測儀和2010年研制出現場快遞檢測ATP試劑一體化拭子，并且取得了國內*手持式ATP熒光檢測系統相應的發明，隨著需求的擴大和其產品儀器試劑逐步走向成熟，國產產品銷售強勁增長逐步替代了進口儀器的份額。

◆從2005年即開始手持式ATP熒光檢測儀及配套試劑研制◆2006年承擔西安市科技計劃項目“基于ATP熒光和焦磷酸測序的有害病源快速檢測系統及儀器”◆2007年手持式ATP熒光檢測系統申請，2009年獲得國家發明授權證書◆2007年手持式ATP熒光檢測儀獲得國家科技型中小企業技術創新基金支持，2010年并通過驗收

手持式ATP熒光檢測儀獲得國家科技型中小企業技術創新基金支持

◆2007年獲得了質量檢驗機構的檢驗報告，性能達到和超過相關部門規定指標◆2008年獲國家重點新產品證書◆2009年開始出口創匯◆2010年獲得陜西省二等獎和西安市科技二等獎各一項◆2010年獲全國發展展覽會銀獎◆2012年現場快速一體化檢測ATP試劑獲得國家授權

◆時至2010年BioLum型手持式ATP熒光檢測儀和現場快速檢測ATP試劑一體化拭子進入批量生產，性能達到和超過國家標準要求，滿足食品藥品監督部門、衛生監督部門、食品加工行業、餐飲服務行業、航空配餐、大型企業食堂、學校食堂、大型活動保障部門等食品安全涉及領域細菌和環境物體表面檢測、手衛生檢測、餐飲具表面潔凈度檢測；化妝品制造業污染控制、醫院感染控制、空氣細菌污染檢測、環境監管部門等污染監管領域細菌檢測和表面潔凈度檢測。◆2011年、2012年滿足上述國家衛生監督和食品藥品監督部門等國家需求，替代進口產品。◆2012年受國家863科技計劃和陜西省科技統籌創新工程計劃滾動支持，進一步研究用于醫用水質檢測、醫療器械清洗后效果評價等更高性能ATP熒光檢測儀

國家法規要求使用ATP儀

/手持ATP熒光檢測儀

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? GB 4789.3 食品衛生微生物學檢驗? GB 5749 生活飲用水衛生標準? WS/T 313醫務人員手衛生規范? 藥品GMP認證檢查評定標準國食藥監安[2007]648號? 中國藥典2010版藥品微生物檢查法? 餐飲服務食品安全現場快速檢測設備? 燒傷病房/手術病房/普通病房物體表面衛生學標準? 醫院感染監測規范? 縣級衛生監督機構現場快速檢測設備裝備標準（須配備ATP熒光檢測儀用于餐飲具、食品加工工具、用具等物品表潔凈度快速測定）? 餐飲服務食品安全現場快速檢測設備配備基本標準（須配備ATP熒光檢測儀用于餐飲具、食品加工工具、用具等物品表潔凈度快速測定）

ATP方法使用和評價

/手持ATP熒光檢測儀

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ATP熒光檢測法能在十幾秒內實現檢測，它大大提升了傳統細菌培養法24-48小時的工作效率，ATP方法的實現包括儀器、試劑和如何使用三大要素。

當儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達到10-15-10-18摩爾 ATP范圍時，可以用于 食品表明微生物檢測、手衛生檢測、餐飲器具潔凈度檢測、重點科室和重要活動場所（如奧運會、世博會、人大政協會議等）物表檢測和衛生安保、食品加工器具、工作臺等關鍵控制點消毒結果檢測、醫療環境工作平臺（器械表面、內窺鏡、空調進出氣口）衛生學即時評估，其實時監測數據能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求；當儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達到10-17-10-19摩爾ATP范圍時，可用于更高要求的檢測如復用醫療器械清洗效果后評估和二次清潔處理評價、醫療用水檢測等。當然目前國外ATP設備和試劑的研發已經向更高目標——可檢測到1O-18至10-21摩爾水平的ATP努力，檢測試劑也可達到5個細菌細胞的水平。

的ATP試劑盒，必須是可去除游離ATP和體細胞ATP，只針對細菌細胞ATP檢測，所謂去除干擾物，這是基本要求。其次熒光素酶、蟲螢光素、裂解液、取樣拭子等組分設計成一體化，整體便于現場攜帶方便檢測使用，試想如果不是ATP試劑一體化拭子形式，而是各組分瓶瓶罐罐帶到現場臨時配制試劑如何能做到準確性和現場快速檢測呢？

是影響準確性和一致性的關鍵之一，可按照<<醫院消毒衛生標準 附錄A（規范性附錄）采樣及檢查方法>>等規范要求再參照手持式ATP儀說明書采樣、檢測、計算得出結果并記錄報告。采樣：（面積類）將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦個兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉動采樣拭子。（體積類）將ATP拭子采樣棒一支在待測液體充分浸濕。檢測：將拭子放入手持ATP儀，獲得被測樣本與細菌污染程度相對應的ATP生物熒光值，得出菌落數指標（詳見下文操作步驟及定標評價）。另外天隆牌ATP儀自帶的軟件能自動將ATP熒光值儲存、處理和傳輸。如何使用  檢測操作步驟

手持式ATP 熒光檢測儀

結果判讀

/手持ATP熒光檢測儀

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以上取樣、檢測全過程在１分鐘之內快速完成，比起24-48小時的傳統細菌培養優勢巨大。細菌數量與細菌內所含ATP量有明確的相關性，通過檢測ATP含量可間接得出細菌數量，即ATP熒光檢測儀檢測結果顯示的發光值——相對照度單位RLU讀數與常規細菌培養法結果菌落數CFU具有很高的相關性，兩者沒有統計上的顯著差異，因此這也是ATP熒光法細菌檢測的理論基礎。舉例來說，某食品加工廠上班前使用ATP檢測儀對生產工人進行手衛生檢測，檢測值<80RLU合格參考值時，判定洗手消毒合格；檢測值≥80RLU合格參考值時判定洗手消毒不合格，需要重新洗手直至滿足規定的合格參考值才能上崗工作，合格參考值（如８０）的確定需科學合理，不同應用場合不建議規定統一的參考值，須根據不同品牌ATP熒光儀、ATP試劑、被測對象潔凈度不同要求等具體情況和對一定量的檢測數據進行統計學分析來確定。