離心技術主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉下,由于強大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)加快沉淀速度,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質量、大小和密度。
基本原理:
當一個粒子(生物大分子或細胞器)在高速旋轉下受到離心力作用時,此離心力“F”由下式定義,即:
F = m&S226;a = m&S226;ω2 r
a — 粒子旋轉的加速度, m — 沉降粒子的有效質量,ω—粒子旋轉的角速度, r—粒子的旋轉半徑( cm )。
通常離心力常用地球引力的倍數來表示,因而稱為相對離心力 “ RCF ”。或者用數字乘“g”來表示,例如25000×g,則表示相對離心力為25000。相對離心力是指在離心場中,作用于顆粒的離心力相當于地球重力的倍數,單位是重力加速度“g”
(980cm/sec2),此時“RCF”相對離心力可用下式計算:
RCF = 1.1∴19×10-5×(rpm)2 r
( rpm — revolutions per minute每分鐘轉數,r/min )
由上式可見,只要給出旋轉半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。但是由于轉頭的形狀及結構的差異,使每臺離心機的離心管,從管口至管底的各點與旋轉軸之間的距離是不一樣的,所以在計算是規定旋轉半徑均用平均半徑“ra v”代替:
ra v=( r min+rmax) / 2
一般情況下,低速離心時常以轉速“rpm”來表示,高速離心時則以“g” 表示。計算顆粒的相對離心力時,應注意離心管與旋轉軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通常總是用地心引力的倍數“×g”代替每分鐘轉數“rpm”
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