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LAC/LA ELISA
LAC/LA ELISA樣品收集、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測
ELISA試劑分類: RD試劑盒,GBD試劑盒,IBL試劑盒
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
上海乾思生物科技代理**進口試劑盒,經銷眾多生命科學領域的ELISA試劑盒,生化試劑,標準品,抗體,培養基,血清,為中國科研試劑供應商之一,質量被全國各大院校科研機構認可,
并為Elisa試劑盒長期供應商.
上海乾思生物科技有限公司特別供應進口分裝elisa檢測試劑盒,規格48T/96T,2-8℃保存,快遞運輸。上海乾思生物成立于2007年,生產經營進口分裝的試劑盒產品,有人試劑盒、大鼠試劑盒、小鼠試劑盒、雞試劑盒、鴨試劑盒、豚鼠試劑盒、牛試劑盒、兔子試劑盒、羊試劑盒、山羊試劑盒、綿羊試劑盒、魚試劑盒、豬試劑盒,并且提供試劑盒代測技術服務等。
乾思生物科技有限公司
Shanghai biobaiye Biotech Co.,Ltd
供應人elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、兔elisa試劑盒等。標本有:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,在尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結合,
使阻遏蛋白的空間構像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,
IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定。
4、X-gal:5-溴-4-氯。
樣品收集、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測
ELISA試劑分類: RD試劑盒,GBD試劑盒,IBL試劑盒
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
上海乾思生物科技代理**進口試劑盒,經銷眾多生命科學領域的ELISA試劑盒,生化試劑,標準品,抗體,培養基,血清,為中國科研試劑供應商之一,質量被全國各大院校科研機構認可,
并為Elisa試劑盒長期供應商.
上海乾思生物科技有限公司特別供應進口分裝elisa檢測試劑盒,規格48T/96T,2-8℃保存,快遞運輸。上海乾思生物成立于2007年,生產經營進口分裝的試劑盒產品,有人試劑盒、大鼠試劑盒、小鼠試劑盒、雞試劑盒、鴨試劑盒、豚鼠試劑盒、牛試劑盒、兔子試劑盒、羊試劑盒、山羊試劑盒、綿羊試劑盒、魚試劑盒、豬試劑盒,并且提供試劑盒代測技術服務等。
乾思生物科技有限公司
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供應人elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒。
注:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為縱坐標(對數坐標),OD值為橫坐標(對數坐標),在對數坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
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