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單細(xì)胞ICP-MS 監(jiān)測(cè)淡水藻類對(duì)金納米顆粒的攝入行為

閱讀:711      發(fā)布時(shí)間:2017-06-02
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對(duì)于人類健康和環(huán)境安全來(lái)說(shuō),監(jiān)測(cè)單細(xì)胞對(duì)于金屬離子和納米顆粒(NPs)的攝入都是非常重要的。目前,利用ICP-MS 對(duì)于細(xì)胞內(nèi)金屬含量的常規(guī)測(cè)定方法為:通過(guò)離心或過(guò)濾將細(xì)胞從其天然培養(yǎng)介質(zhì)中分離出來(lái),再用新鮮介質(zhì)進(jìn)行清洗,然后用酸消解后上機(jī)檢測(cè)。采用這種方法可以得到一定數(shù)量細(xì)胞中金屬的總量,而無(wú)法獲得單個(gè)細(xì)胞的相關(guān)數(shù)據(jù),單個(gè)細(xì)胞內(nèi)金屬的含量只能通過(guò)假定所有細(xì)胞內(nèi)含有的金屬顆?;螂x子濃度相同,通過(guò)計(jì)算獲得。而通過(guò)透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM) 或熒光示蹤法的輔助表征,證明利用這種方法獲得的單細(xì)胞數(shù)據(jù)并不準(zhǔn)確。如果利用上述顯微方法對(duì)細(xì)胞攝入納米顆粒進(jìn)行表征,又存在耗時(shí)長(zhǎng)、人為誤差大的缺點(diǎn)。而且,TEM 和SEM 法只能定性,也容易由于納米顆粒標(biāo)示物化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定而導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。相比于這些常規(guī)方法,全新的基于單顆粒ICP-MS(SP-ICP-MS)的單細(xì)胞ICP-MS(SC-ICP-MS)具有可以地對(duì)單個(gè)細(xì)胞中金屬離子或納米顆粒進(jìn)行定量的優(yōu)勢(shì),一次性檢測(cè)的細(xì)胞數(shù)量也大于顯微鏡方法。與SP-ICP-MS類似,SC-ICP-MS 是基于利用等離子體將單個(gè)細(xì)胞*離子化后對(duì)離子含量進(jìn)行測(cè)定來(lái)獲得結(jié)果的。SC-ICP-MS 的優(yōu)勢(shì)在于可以在更短的時(shí)間內(nèi)分析更多的細(xì)胞數(shù)量;具有快速的數(shù)據(jù)采集速率,低于100μs 的駐留時(shí)間保證數(shù)據(jù)具有更高的精密度。NexION ICP-MS *的單細(xì)胞檢測(cè)能力可用于研究細(xì)胞內(nèi)部在其自然環(huán)境中固有的金屬含量和對(duì)于金屬的攝入行為,從而對(duì)生物曝露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行研究和評(píng)估。本文介紹了利用SC-ICP-MS 技術(shù)監(jiān)測(cè)單個(gè)淡水藻類(Cyptomonas ovata)對(duì)金離子和納米顆粒的攝入行為。

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