液相色譜儀的應用zui廣泛的要數醫藥行業,為什么這么說呢?因為藥物的研制,成分分析,試驗時候的分析以及zui后試驗后的殘留分析都是需要液相色譜儀!由此可見每一個環節都是至關重要,每一個環節都需要用到液相色譜儀.
在進行液相色譜儀檢測之前,選定流動相之后,須對流動相進行過濾去除雜質處理,主要使用溶劑過濾器,配備真空泵以加快過濾速率,其中,起關鍵作用的是過濾膜。根據流動相溶液的不同,選用溶劑過濾器濾膜的類型也不盡相同。濾膜主要分為水系濾膜和有機系濾膜兩種,這兩種濾膜的孔徑非常小,過濾效果好。
水系濾膜適用于水基溶液,不耐有機溶劑,具有較高的化學和熱穩定性,流速快、耐酸堿能力強,具有高機械強度,對蛋白質吸附力較低。
有機濾膜為疏水性濾膜,適用于有機溶劑及空氣過濾。耐酸耐堿,抗氧化劑。耐高溫,強度好,化學性能穩定。不僅適用于含有酸堿性的水溶液,更適用于含有有機溶劑,如醇類、烴類、脂類、酚類、酮類等有機溶劑。
液相色譜儀圖片
液相色譜儀在藥物生產中進行中間控制:生產抗菌素時,首先要了解發酵液中的主體與付產物的存在情況。例如:青霉素、四環素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉 素等的發酵產物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動相或用離子對法,分析主體及其收產物的含量。對普魯卡因酰胺、茶堿等可進行主體含量的測定,對硝 酸甘油可測定主體含量及其降解產物,以便保證藥物的熱量。
液相色譜儀能分離分析藥物的組分含量:由于一種藥劑常含有多組分,一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測得各組分的含量。
液相色譜儀能測定藥物在各種器官中的代謝產物,特別是研究藥物的代謝產物在血清中存在的情況。如測血清中的酮酸及戊二酸。測尿中代謝產物更為方便,不需要繁鎖的預處理。因為研究尿中的組分能鑒別病人的代謝功能,對病理研究或監床診斷均具有重要的參考價值。
液相色譜儀能分析藥物在體內的殘量:這是近來研究新藥效能很主要的內容之一,如冬凌草甲素是植物中的一組分,有抗癌效果,但是毒性大。測定其在血清中含量很重 要,現在可用C18柱及甲醇水為流動相,測定處理后的血清樣品,即可得到血中的含量。如磺胺類藥品在血清及尿中含量也不允許太大,可用C18柱及酸性乙醇 為流動相,測定含量后,則可估計zui合適的用藥劑量。又如四環素、巴比妥酸、止痛藥、退燒藥、護糖尿病的藥物等,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水 為流動相來測定含量。因此,反相色譜法應用范圍極廣。
在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,即固定相;另一相則不斷流過固定相,即流動相。色譜法的分離就是溶于流動相中的各組分經過固定相時,由于與固定相發生作用的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出的分離過程來進行分離。
更詳細地說就是使用外力使含有樣品的流動相通過與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,混合物中的各組分與固定相發 生相互作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)。由于混合物中各組分在性質和結構上的差異,與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同,隨著流動相的移 動,混合物在兩相間經過反復多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出,從而實現混合物中各組分的分離與檢測。
看完以上內容,是不是覺得液相色譜儀跟醫藥行業是真的息息相關,但是還有一個重點不要忘記,不是只要有液相色譜儀就可以,還要有好的液相色譜儀,如果儀器質量不高,那也是沒有用的!
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