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Dxy SuperScript™ III 鏈cDNA合成系統
  • Dxy SuperScript™ III 鏈cDNA合成系統
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更新時間:2024-11-20 16:01:52

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用于RT-PCR的SuperScriptIII鏈合成系統經過優化,以從純化poly(A)+或總RNA合成鏈cDNA
    用于 RT-PCR 的 SuperScript III 鏈合成系統經過優化,以從純化 poly(A)+ 或總 RNA 合成鏈 cDNA。使用該系統可檢測 100 bp 至 >12 kb 的 RNA 靶標。起始材料量的范圍為 1 pg – 5 µg 總 RNA。SuperScript III 逆轉錄酶是 M-MLV RT 的一個版本,經工程改造后 RNase H 活性得到降低且熱穩定性得到提高。該酶可用于在 42–55°C 的溫度范圍內合成 cDNA,相較于其他逆轉錄酶,可提供更高特異性、更高 cDNA 得率和更多全長產物。因為 SuperScript III RT 不會受到核糖體和轉運 RNA 的顯著抑制,所以其可用于從總 RNA 制備物合成鏈 cDNA 的過程。

    使用 SuperScript III 鏈系統
    在步中使用總 RNA 或用 oligo(dT)、隨機引物或基因特異性引物引發的 poly(A)+ 選定 RNA 進行 cDNA 合成。在第二步中,使用目的基因特異性引物在單獨的管中進行 PCR。對于 PCR 反應,我們推薦以下 DNA 聚合酶之一:PlatinumTaq DNA 聚合酶可提供自動熱啟動條件,可使特異性提高至 4 kb,PlatinumTaq 高保真 DNA 聚合酶可為高達 15 kb 的靶標提供更高的得率和高保真度,而 PlatinumPfx DNA 聚合酶可為高達 12 kb 的靶標提供極大保真度。

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