Abmole M4839 CCK8試劑盒500T
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AbMole生物是世界領xian的高品質生命科學產品供應商,主營細胞信號通路的高特異性小分子抑制劑、API、天然產物等生物活性分子,間充質干細胞細胞株、wan全培養基,細胞培養服務。
Abmole CCK8試劑盒
Abmole M4839 CCK8試劑盒500T,產品簡介:
產品品牌:Abmole
產品貨號:M4839
產品名稱:CCK8試劑盒
英文名稱:Cell Counting Kit-8
產品規格:500T
產品說明:
>Cell Counting Kit 簡稱CCK 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,
化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于
細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
>WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些
脫氫酶還原生成橙黃色的formazan (參考圖1)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,
則顏色越淺。 對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
CCK 法與MTT法之間的比較:
細胞計數方法 | MTT法 | CCK法 |
形成的formazan的水溶性 | 差 | 好 |
產品性質 | 粉末 | 溶液 |
使用方法 | 預先配置 | 無需預先配置 |
檢測時間 | >4小時 | 1~4小時 |
靈敏度 | 一般 | 靈敏度更高 |
檢測波長 | 560~600nm | 430~490nm |
細胞毒性 | 高,細胞形態wan全消失 | 低,細胞形態不變 |
試劑穩定性 | 一般 | 好 |
是否需要DMSO溶解 | 需要 | 不需要 |
便捷程度 | 一般 | 非常便捷 |
使用說明:
1、通常在96 孔板中,細胞增殖實驗和細胞毒性實驗分別接種細胞懸液(5000個細胞和2000個細胞/100μL/孔,具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小、細胞增殖速度的快慢等因素決定)。設置加了相應量細胞培養液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。
2、細胞貼壁24小時后,按照實驗需要,進行培養并給予0-10微升特定的藥物刺激。
3、藥物處理2~4天,然后每孔加入10 μL 的CCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD 值的讀數)。
4、將培養板在培養箱內孵育1~4 小時,然后用酶標儀測定在450nm 處的吸光度。
5、如果暫時不測定OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10 μL 0.1M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24 小時內吸光度不會發生變化。
6、培養基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。
注意事項:
1. 由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加相同量的PBS、 水或培養液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方,以緩解蒸發。
2. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應, 所以還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測, 如果待檢測體系中存在較多的還原劑,需設法去除。
3. 用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡,否則會干擾測定。
4. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
活力計算:
細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0 加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細胞、CCK 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養基和CCK 溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A(0 加藥):具有細胞、CCK 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力
保存條件:4oC避光保存一年有效, -20oC避光保存兩年有效。
Abmole CCK8試劑盒
產品訂購信息
Abmole M4839 CCK8試劑盒500T