豬封閉蛋白3(CLDN3) ELISA 試劑盒 

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

豬封閉蛋白3(CLDN3) ELISA 試劑盒   

樣本處理

在處理樣本時，需要保證無菌操作，避免污染。同時，需要按照試劑盒說明書的要求，將樣本進行適當的稀釋和處理。如果樣本中存在雜質或顆粒物，需要*行離心或過濾處理。

ELISA試劑盒如何操作

ELISA試劑盒的操作步驟如下：

1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。

2.洗滌：棄包被液（用力拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。

3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。

4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。

5.結合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢血清，每孔100μl，要設立陰性對照，37℃孵育1.5h。

6.洗滌：同上。

7.結合酶標二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數根據產品不同有所不同，可按說明書進行）50μl，37℃孵育1h。

8.洗滌：同上。

9.顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。

10.待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應。使用酶標儀讀取450nm的OD值，以確定血清抗體水平。

以上步驟僅供參考，具體操作請根據實際情況和產品說明書進行。

ELISA測定結果如何計算

ELISA測定結果計算方法如下：

1.計算陰性對照A值的平均數(NCX )和陽性對照A值的平均數(PCX)。

2.兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值，例如0.400，試驗才有效。

3.3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而已另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍，則該次實驗無效。

4.陽性判定值按下式計算：陽性判定值=NCX+0.05。

5.標本A值>陽性判定值的為陽性，小于陽性判定值的為陰性。

需要注意的是，試劑盒的常數只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。

注意事項

1. 實驗前請仔細閱讀本試劑盒的使用說明，確保所有材料、器具和試劑準備齊全。

2. 為保證實驗結果的準確性，請務必遵循實驗步驟進行操作，并注意控制實驗條件的一致性。

3. 實驗過程中請勿觸摸酶標板上的酶標抗體區域，以免影響實驗結果。

4. 實驗結束后請及時清洗并整理實驗器具，避免交叉污染。

5. 本試劑盒僅供體外診斷使用，使用前請仔細閱讀說明書，如有疑問請及時聯系廠家或專業技術人員。

公司簡介

     上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業。總部位于上海，并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩定的質量和較為完善的售后服務確立了“篤瑪生物"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨"的發展理念，擁有專業的研發和質量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統。“篤瑪生物"已經得到全國科研工作者的認可。

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