膜蛋白作為復雜性功能蛋白,在物質運輸、信號傳導、能量轉換及細胞增殖分化中發揮著重要作用,基于上述膜蛋白在細胞中的各種功能,膜蛋白一直是各研究方向的熱點。
目前,在藥物研發中,一半以上的藥物靶點都是膜蛋白。但是由于膜蛋白結構特點,在研究中的重組表達上一直是一個難點,而具體多種原因包括以下幾點:
膜蛋白定位:膜蛋白功能的正確行使,和其正確定位有著必要的關系,但是要保證膜蛋白的天然構象及正確的靶向和插入細胞膜是具有很大的難度;
跨膜蛋白疏水性:因為跨膜蛋白具有疏水區域,是它們能夠穩定的嵌入細胞膜中,所以水環境中的蛋白表達出現錯誤折疊或聚集沉淀的問題;
蛋白質毒性:在跨膜蛋白大量表達時,因疏水區域問題,可能會出現大量錯誤折疊或未折疊的蛋白,而這些蛋白在內質網的積累會激活細胞應急反應,導致細胞死亡;
天然表達水平低:某些膜蛋白在天然表達水平上非常低,所以后續的純化和檢測難度較大,重復困難,增加時間成本。
案例一
案例二
無細胞蛋白表達技術可以很好的解決上述中膜蛋白表達的問題,此技術是在體外實現DNA到蛋白質的轉錄翻譯過程,反應體系中包括轉錄翻譯所必需的元件、物質和能量,并且我們會根據不同蛋白質特點構建不同的體外反應體系,確保目的蛋白的正確表達與折疊。如上圖所示,在我們的預實驗中,四次跨膜蛋白及七次跨膜蛋白使用無細胞蛋白表達體系表達,加入特殊配置的輔助分子試劑后,在上清液中得到了可溶性的目的蛋白,且產量水平清晰可見。
所以,我們相信無細胞蛋白表達技術能夠助您在蛋白表達研究中更高效快捷。
珀羅汀生物于2017年在蘇州工業園區成立,是一家專業的無細胞蛋白表達生物技術公司。公司擁有國家高層次人才、海歸博士等人才組成的專業技術團隊,以自主研發具特色的無細胞蛋白表達技術平臺為依托,為廣大生物醫藥、合成生物學等企業、研究機構提供無細胞蛋白表達產品、蛋白原料試劑及定制化服務。
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