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環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)—操作方法
取芽孢數(shù)在30cfu/mL-300cfu/mL的稀釋級(jí)別的試管(10-4)震蕩30s,每支稀釋管平行制備2個(gè)平皿,每皿加1mL菌懸液,注入15mL-20mL溫度不超過(guò)45℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)。等待瓊脂凝固后,倒置于30℃-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h-72h后計(jì)數(shù)。
總芽孢數(shù)cfu/片(支)=平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)。
注意事項(xiàng)
1、切勿將生物指示劑進(jìn)行紫外照射消毒,建議對(duì)初級(jí)包裝進(jìn)行擦拭。
2、環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù),建議使用含0.1%聚山梨酯80的無(wú)菌純化水進(jìn)行稀釋。
3、吸取含紙質(zhì)載體的菌液時(shí),避免纖維堵槍頭,導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確。
4、建議以單片(支)生物指示劑的形式進(jìn)行計(jì)數(shù),確保每片(支)生物指示劑計(jì)數(shù)結(jié)果均符合要求。
5、建議使用玻璃珠(4mm-6mm)對(duì)紙質(zhì)載體進(jìn)行打散處理。
6、芽孢計(jì)數(shù)過(guò)程中必須進(jìn)行熱激活處理:溫度80℃-85℃,時(shí)間10min。