供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250 test |
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貨號 | MD-20002 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡介
詳細介紹
DL-Cyto-Fix & Perm Kit主要應用于細胞內(nèi)細胞因子或其他細胞質(zhì)分子染色,可固定并透化細胞,進而對細胞內(nèi)蛋白質(zhì)進行染色。C-Perm/Wash Buffer經(jīng)過反復優(yōu)化,可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號強度。流式胞內(nèi)染色試劑盒
流式胞內(nèi)染色試劑盒
產(chǎn)品特點
特異性強,熒光信號強度高
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Cat log # | 規(guī)格 | 儲存條件 |
流式核內(nèi)染色試劑盒 | MD-20002 | 1 kit | |
Fix/Buffer (1X) | MD-20002-F | 125ml | 4℃ |
C-Perm/Wash Buffer (10X) | MD-20002-PW | 100ml | 4℃ |
試劑配制
工作濃度C-Perm/Wash Buffer(1X):將1體積C-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水,如將1ml C-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水,配制成10ml的1X C-Perm/Wash Buffer。1X C-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內(nèi)使用。
使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關(guān)實驗)
1.細胞刺激:根據(jù)所使用細胞和所需檢測的分子特性,預先處理細胞。如所檢測胞內(nèi)分子為分泌型分子,需提前使用高爾基阻斷試劑阻斷檢測分子的分泌從而將所測分子滯留在細胞內(nèi)以便后續(xù)檢測。
2.表面染色(可選):收集細胞后,每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體,充分重懸細胞,4℃,避光孵育30min后,加入500ul表面染色緩沖液,300g×5min,4℃離心,棄去上清液;
3.向每管細胞中加入200ul Fix Buffer (1X),充分重懸細胞,4℃避光孵育12分鐘;
注:務必控制固定孵育溫度和時間,改變孵育條件可能導致染色結(jié)果誤差!注:建議細胞密度不高于10^7/ml;如細胞量多,可根據(jù)細胞量等比增加所使用Fix Buffer的量。
4.向每管細胞中加入500ul 1X C-Perm/Wash Buffer;
5.600g×5min離心,4℃,棄去上清液;
6.抗體孵育:每管加入100ul 1X C-Perm/Wash Buffer和適量體積的胞內(nèi)抗體,充分重懸細胞;
7.2-8°C避光孵育1h以上或過夜;
8.向每管細胞中添加500ul 1X C-Perm/Wash Buffer,洗去抗體;
9.600g×5min離心,4 ℃,棄去上清液;
10.將細胞重懸于300ul-500ul 1X C-Perm/Wash Buffer進行上機分析。
注:在室溫下保存時,樣品應在2小時內(nèi)進行上機分析;在2-8°C下保存時,應在24小時內(nèi)分析樣品。