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T4 DNA Polymerase | T4 DNA Polymerase | MedChemExpress (MCE)

閱讀:49      發布時間:2024-10-8
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T4 DNA Polymerase

MCE 國際站:T4 DNA Polymerase

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲條件: -20°C,1 年

簡介:T4 DNA聚合酶具有5′→3′的DNA聚合酶活性,能夠在擁有模板和引物的情況下,催化沿5′→3′方向DNA的合成。

概述:T4 DNA聚合酶具有5′→3′的DNA聚合酶活性,能夠在擁有模板和引物的情況下,催化沿5′→3′方向DNA的合成。本酶還擁 有單鏈DNA特異性的3′→5′的外切核酸酶活性,該活性比 Klenow片段強100-1000倍,適用于3′突出端的切平。和DNA聚合酶I不同,本酶不具有5′→3′外切核酸酶的活性。

描述:

該酶還具有單鏈 DNA 特異性 3' → 5' 核酸外切酶活性,比 Klenow 片段強 100-1000 倍,適合切斷 3' 突出端。與 DNA 聚合酶 I 不同,該酶不具有 5'→3' 核酸外切酶活性。


操作說明:DNA 3′突出末端的平滑化1) 將試劑溶化后,在冰上配制反應體系;2) 70℃反應 5 分鐘,防止 DNA 末端退火,然后置于 37℃ 水浴鍋中。3) 加入 0.2 μL T4 DNA 聚合酶,輕輕混勻,保溫 5 分鐘。 4) 用渦旋儀振蕩攪拌可使酶失活,如果進行連接反應,最好立即進行。如果不立即進行,應立即進行苯酚/氯仿處理,乙醇沉淀后 20℃保存。

注意事項:1. 使用時將酶置于冰上操作,使用完畢后 -20℃保存。2. 需要 Mg2+存在才能使酶發揮活性,金屬 離子螯合劑可抑制酶的活性。3. 反應體系中離子強度超過 100 mM 時,活 性將被抑制。 4. 易受模板 DNA 高級結構影響,T4 噬菌體 基因 32 編碼蛋白可以顯著提高聚合酶活性,但 3′→5′外切核酸酶活性則被抑制。5. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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