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NK-92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
產品基本信息
細胞名稱：NK-92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
種屬來源：人
組織來源：淋巴
細胞形態：淋巴母細胞樣
生長特性：懸浮生長
培養基: NK92專用*培養基(已添加IL2)
生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代方法：1:2至1:3，每周 3次
凍存條件：10%DMSO+50%FBS+40%*培養基，液氮儲存
支原體檢測：無
注：該細胞復蘇后需一周左右時間方可恢復狀態，凍存時密度盡量大些。
細胞培養操作
復蘇：37℃水浴融化后，750 rpm離心5 min，棄凍存液，加入培養基重懸，在培養瓶中培養，起始密度為每毫升2-3×105個細胞
傳代：搖晃培養瓶，使細胞粗略混勻，取細胞計數，按每毫升2-3×105個活細胞的細胞密度進行全換液或半換液。每48 h傳一次。
凍存：凍存液：10%DMSO+50%FBS+40%*培養基，細胞計數后，取1×106~1×107個細胞，800 rpm離心5 min，棄原培養基，加入1 mL凍存液，輕輕混勻，標注封口后，放入凍存盒，置于-80℃ 24 h，隔天再置于液氮氣象。
注意事項：
1. IL-2分裝使用，避免反復凍融;
2. 先配置基礎培養基，用的時候再將IL-2加入培養基中;
3. 傳細胞時，細胞不能在培養箱外放太久，小于1 h;
4. 重懸NK-92細胞要輕柔，不要太劇烈;
5. 不要加抗菌素，若一定要加，就加1%的青;
6. 全換液比半換液好些，每48 h傳代一次;
7. 培養該細胞一定要IL-2 500-1000 U/ml，IL-2濃度無需再增高，過高會影響細胞生長，也不能再降低，過低細胞會死亡;
8. 培養過程中有少量細胞分泌物屬于正常現象，不影響細胞生長。
培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否*揮發，細胞是否解凍，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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