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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×106cells/T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | IM-H494 |
NK-92MI（人惡性非霍奇金淋巴瘤殺傷細胞）
產品基本信息
細胞名稱：NK-92MI（人惡性非霍奇金淋巴瘤殺傷細胞）
種屬來源：人
組織來源：外周血
細胞形態：淋巴母細胞樣
生長特性：懸浮生長
培養基:：在不含核糖核酸苷和脫氧核糖核酸苷，但含有2mm L-谷氨酰an和1.5 g/L碳酸氫na的Alpha Minimum Essential medium(αMEM)中加入以下成分：0.2 mM肌醇;0.1 mM β巰基乙醇;0.02 mM葉suan;終濃度為12.5%的馬血清(HS)和12.5%的胎牛血清(FBS)+1%PS
生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代方法：1:2至1:3，每周 2-3次
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
支原體檢測：無
注：1.該細胞復蘇后需一周左右時間方可恢復狀態，凍存時密度盡量大些。
2. 培養過程中有少量細胞分泌物屬于正常現象，不影響細胞生長。
3. 傳細胞時，細胞不能在培養箱外放太久，最好小于1 h
4. 重懸細胞要輕柔，不要太劇烈
細胞培養操作
1)復蘇細胞：37℃水浴融化后，850 rpm離心5 min，棄凍存液，加入培養基重懸，在培養瓶中培養，起始密度為每毫升2-3×105個細胞
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
搖晃培養瓶，使細胞粗略混勻，取細胞計數，按每毫升2-3×105個活細胞的細胞密度進行全換液或半換液。每48 h傳一次。
3)細胞凍存：凍存液：10%DMSO+50%FBS+40%完培養基，細胞計數后，取1×106~1×107個細胞，850 rpm離心5 min，棄原培養基，加入1 mL凍存液，輕輕混勻，標注封口后，放入凍存盒，置于-80℃ 24 h，隔天再置于液氮氣象。
培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的完培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
懸浮細胞收貨注意事項：
1、收貨時需鏡下拍照(看密度、狀態)
2、靜置后需鏡下拍照(看整體密度)
a.如密度50%以下，建議換液并豎瓶培養
b.如密度50%-80%，建議換液培養，隔天觀察密度
c.如密度90%，建議傳代
3、換液及傳代處理前，培養瓶豎著放置至少半小時(使細胞沉到瓶底);收集上清，必須將瓶內所有培養基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)潤洗瓶底并收集!離心轉速為1000rpm，5min。
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