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中級(jí)會(huì)員 | 第2年

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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

時(shí)間:2024/1/19閱讀:693
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        實(shí)驗(yàn)原理是在大量觀察、科學(xué)實(shí)驗(yàn)和社會(huì)實(shí)踐的基礎(chǔ)上,通過(guò)分析、推理、歸納和概括得到的,描述事物存在和運(yùn)動(dòng)規(guī)律的具有普遍意義的理論。它是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的理論依據(jù),指導(dǎo)著實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程,從實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡脑O(shè)定到實(shí)驗(yàn)操作的每一個(gè)步驟,再到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析與解釋。
在物理實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)原理通常體現(xiàn)為一條或幾條物理定律、公式或定理。例如,在探究物體自由落體運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)原理可能是牛頓的第二定律或重力加速度的定義;在測(cè)量電阻的實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)原理可能是歐姆定律。實(shí)驗(yàn)原理不僅為實(shí)驗(yàn)提供了必要的思想指導(dǎo),還是評(píng)估實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確性的標(biāo)準(zhǔn)。
實(shí)驗(yàn)原理與實(shí)驗(yàn)方法不同。實(shí)驗(yàn)方法是指在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所采用的具體技術(shù)或手段,如控制變量法、等效法、轉(zhuǎn)換法等。這些方法是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)原理
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試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))是一種用于檢測(cè)和定量蛋白質(zhì)、抗原或抗體的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。以下是一些常見(jiàn)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理:
P53 ELISA試劑盒:采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中的人P53蛋白水平。純化的人P53抗體包被微孔板,形成固相抗體。將待測(cè)樣本中的P53蛋白與固相抗體結(jié)合,然后加入HRP標(biāo)記的P53抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后,加入底物TMB,在HRP酶的催化下,TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,然后在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。通過(guò)測(cè)定450nm波長(zhǎng)下的吸光度(OD值),并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中P53的濃度。
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)ELISA試劑盒:同樣采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中的人SDF-1β水平。純化的人SDF-1β抗體包被微孔板,形成固相抗體。將待測(cè)樣本中的SDF-1β與固相抗體結(jié)合,然后加入HRP標(biāo)記的SDF-1β抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后,加入底物TMB,在HRP酶的催化下,TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,然后在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。通過(guò)測(cè)定450nm波長(zhǎng)下的吸光度(OD值),并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中SDF-1β的濃度。
兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒:使用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔p物質(zhì)(SP)的水平。純化的兔p物質(zhì)(SP)抗體包被微孔板,形成固相抗體。將待測(cè)樣本中的p物質(zhì)(SP)與固相抗體結(jié)合,然后加入HRP標(biāo)記的p物質(zhì)(SP)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后,加入底物TMB,在HRP酶的催化下,TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,然后在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。通過(guò)測(cè)定450nm波長(zhǎng)下的吸光度(OD值),并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中p物質(zhì)(SP)的濃度。
魚組胺(Histamine)ELISA試劑盒:通常使用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定標(biāo)本中的魚組胺水平。將魚組胺與酶標(biāo)記的抗體結(jié)合,然后加入預(yù)先包被組胺抗體的微孔板。魚組胺與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)性地與酶標(biāo)記抗體結(jié)合。通過(guò)測(cè)定450nm波長(zhǎng)下的吸光度(OD值),并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚組胺的濃度。
這些ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理都基于抗原與抗體之間的特異性結(jié)合,并通過(guò)酶標(biāo)記的抗體來(lái)放大檢測(cè)信號(hào),使得微量樣本的分析成為可能

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