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A549-Dual™ KO-MAVS 細(xì)胞是通過穩(wěn)定敲除 MAVS 基因從 A549-Dual™ 細(xì)胞中產(chǎn)生的。 它們是通過穩(wěn)定整合兩種可誘導(dǎo)報(bào)告基因構(gòu)建體而衍生自人 A549 肺癌細(xì)胞系的貼壁上皮細(xì)胞。

A549 細(xì)胞系是哮喘和呼吸道感染的細(xì)胞模型，表達(dá)多種模式識(shí)別受體 (PRR)，包括 RIG-I [1,2] 和 Toll 樣受體 (TLR) TLR2 [3]、TLR3 和 TLR5 但不是 TLR4 [3]。

A549-Dual™ KO-MAVS 和 A549-Dual™ 細(xì)胞在融合到五個(gè) NF-κB 結(jié)合位點(diǎn)的 IFN-β 最小啟動(dòng)子的控制下表達(dá)分泌型胚胎堿性磷酸酶 (SEAP) 報(bào)告基因。

它們還在 ISG54 最小啟動(dòng)子和五個(gè) IFN 刺激的反應(yīng)元件的控制下表達(dá)分泌的 Lucia 熒光素酶報(bào)告基因。

因此，它們?cè)试S通過評(píng)估 SEAP 的活性來同時(shí)研究 NF-κB 通路，以及通過監(jiān)測(cè) Lucia 熒光素酶的活性來研究干擾素調(diào)節(jié)因子 (IRF) 通路。 當(dāng)使用 QUANTI-Blue™ Solution（一種 SEAP 檢測(cè)試劑）和 QUANTI-Luc™ 4 Lucia/Gaussia（一種 Lucia 和 Gaussia 熒光素酶檢測(cè)試劑）時(shí)，兩種報(bào)告蛋白都可以在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中輕松測(cè)量。