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紫外可見分光光度法檢測維生素B2
閱讀:2715 發布時間:2016-6-12
紫外可見分光光度法測定維生素B2的方法步驟:
1、 待測液的配置:取待測片劑2片,精密稱定、研細,精密稱取適量(約相當于維生素B210 mg),置于1000 mL容量瓶中,加冰醋酸5mL與水100mL,置水浴(100 ℃)加熱1小時,時時搖振,使維生素B2溶解,加水稀釋,冷卻后加氫氧化鈉液(1 mol/L)30 mL。用水稀釋至刻度,搖勻,過濾;棄去初濾液,取續濾液作為待測液。
2、 標準溶液的配置:準確稱取75mg核黃素(維生素B2),置于1000 mL容量瓶中,加少量水使維生素B2溶解,zui后加水定容至刻度得到維生素B2標準試劑(0.075 mg/mL)。
3、 用移液管分別吸取2mL、4mL、5mL、6mL、8mL維生素B2標準試劑(0.075 mg/mL) 于5個25 mL容量瓶中,加水定容至刻度,搖勻。用紫外分光光度計分別測量5個容量瓶中的VB2稀釋液,得到5個吸收度數值A444nm。
4、以VB2稀釋液濃度為橫坐標,A444nm數值為縱坐標,建立VB2濃度與吸收度的標準曲線,然后在444nm波長處測出待測液的吸收度數值,在標準曲線上找到相應的濃度數值即可。