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分子尺寸排阻液相色譜法檢測戊型肝炎類病毒顆粒
閱讀:1013 發布時間:2017-10-23
分子尺寸排阻液相色譜法檢測戊型肝炎類病毒顆粒
戊型肝炎是由悟性肝炎病毒引起的急性病毒性肝炎,主要通過糞—口途徑經腸道傳播。我國是戊型肝炎的流行區,有效的疫苗對控制戊型肝炎的流行十分必要。由于HEV不能在體外培養,相關疫苗的研究主要集中在不經同的表達系統制備種族保護性抗原。HEV ORF2編碼抗原在戊型肝炎的保護性免疫中起重要作用,并可在昆蟲細胞表達系統中自主包裝成戊型肝炎類病毒顆粒,可用于戊型肝炎疫苗的開發。
本實驗親戚構建的HEV ORF2重組桿狀病毒在昆蟲細胞中可自主包裝成HE VLP,并存在HE VLP及ORF2蛋白單體兩種不同構象。由于二者蛋白一級結構相同,在區別分析 VLP和pORF2的同時,需要使用一種條件溫和、不破壞蛋白結構分析方法。本實驗采用分子尺寸液相色譜分析不同方法制備的重組ORF2抗原,旨在建立不同構象 HEV ORF2抗原定性及定量分析的方法。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
測定結果: