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液相色譜-紫外檢測(cè)法測(cè)定水產(chǎn)品中組胺含量
液相色譜-紫外檢測(cè)法測(cè)定水產(chǎn)品中組胺含量
生物胺是一類含氮的有機(jī)化合物，主要有脂肪類、芳香類或雜環(huán)類。其中脂肪族生物胺包括腐胺、尸胺、精胺、亞精胺等，芳香族包括酪胺、*等，雜環(huán)類包括組胺、色胺等。在人和動(dòng)物身體細(xì)胞中，存在適量的生物胺比如組胺、色胺、精胺等，在調(diào)節(jié)機(jī)體生長(zhǎng)、增強(qiáng)機(jī)體新陳代謝活力、控制血壓、消除自由基等方面具有明顯作用。生物胺在很多食品中都存在，尤其是蛋白質(zhì)含量豐富的食品，主要包括動(dòng)物源食品和發(fā)酵類食品。生物胺具有一定的毒性作用，各種胺類毒性大小不同，其中組胺對(duì)人體健康的影響zui大。
組胺又稱組織胺，是一種過敏性毒yao，化學(xué)式是C5H9N3，分子量是111，大量食用后會(huì)引起不良反應(yīng)。水產(chǎn)品中的組胺主要是魚肉在腐朽過程中其機(jī)體中的組胺酸通過其中存在的微生物所產(chǎn)生的組胺酸脫羧酶的脫羧作用而生成。組胺中毒是水產(chǎn)食品存在的主要安全問題之一，全國(guó)各地尤其是沿海地區(qū)組胺中毒事件時(shí)有發(fā)生。當(dāng)有機(jī)體攝入組胺超過100mg時(shí)，即可引起過敏性食物中毒，口服8-40mg組胺將引起輕微中毒癥狀，超過40mg產(chǎn)生中等中毒癥狀，如果超過100mg將產(chǎn)生嚴(yán)重中毒癥狀。美國(guó)食品藥品就愛你度管理局過對(duì)爆發(fā)組胺中毒的大量數(shù)據(jù)的研究，確定組胺的危害作用水平為500mg/kg。歐盟規(guī)定鯖科魚類中組胺含量不得超過100mg/kg，其他食品中組胺不得超過100mg/kg，酪胺不得超過100-800mg/kg。
目前組胺的測(cè)定方法有很多GB/T 5009.45-2003中的水產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法、GB/T 5009。208-2008中的食品中生物胺含量的測(cè)定和GB/T20768-2006中的魚和蝦中有毒生物胺的測(cè)定、液相色譜-紫外檢測(cè)法等方法以及相關(guān)的文獻(xiàn)中提到了偶氮顯色法、苯甲酰氯衍生液相色譜法、單酰氯衍生液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、離子色譜法、波層色譜法和生物電化學(xué)法。液相色譜法由于其具有分析速度快、注效高、檢測(cè)靈敏度高、定量分析準(zhǔn)確等特點(diǎn)，基本取代了其他方法，是目前生物胺含量分析測(cè)定的主要手段。衍生方法主要有柱前衍生和柱后衍生，常用的衍生化試劑有領(lǐng)苯二甲醛、丹磺酰氯、偶氮試劑和苯甲酰氯等，領(lǐng)苯二甲醛存在衍生物不穩(wěn)定等不足，苯甲酰氯不溶于水，衍生效果差，偶氮顯色法容易受到基質(zhì)中雜質(zhì)的干擾，影響測(cè)定結(jié)果。丹磺酰氯具有較理想的衍生效果和穩(wěn)定時(shí)間。而有些標(biāo)準(zhǔn)中鹽溶液作為流動(dòng)相，會(huì)對(duì)分析柱造成損害。本研究綜合了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)，以鯖魚為代表對(duì)液相色譜法測(cè)定水產(chǎn)中組胺含量進(jìn)行了方法改進(jìn)。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡(jiǎn)介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等，實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
質(zhì)譜條件：
進(jìn)樣量 | 20μl |
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柱溫 | 35℃ |
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流動(dòng)相流速 | 1.0ml/min |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 254nm |
測(cè)定結(jié)果：
