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檢測植物組織中多胺含量的液相色譜法
檢測植物組織中多胺含量的液相色譜法
多胺是植物體內具有生理活性的一類有機分子物質,主要有腐胺、尸胺、亞精胺與精胺等。它們與植物的生長發育關系密切,參與植物細胞分裂、DNA凝聚及急速的調控等。它們與植物的生長發育關系密切,參與植物細胞分裂、DNA凝聚及激素的調控等。在環境脅迫下,植物體內積累大量的多胺類物質,對穩定細胞膜、核酸及蛋白質等大分子物質的構象有重要的作用。多胺在人體內也大量存在,并與人類健康息息相關。食物是人體內多胺的重要來源之一。因此如何準確而快速地檢測植物組織中的多胺技術越來越受到人們的重視。
多胺屬脂肪族直鏈胺類,以前主要用氨基酸分析和紙電泳等方法測定,這兩種檢測方法樣品回收率低,檢測靈敏度也不高。目前多用衍生化的方法,即將多胺的一、二級氨基接在對熒光或紫外吸收的基團上,再通過薄層或液相色譜分離檢測。常用的衍生試劑有丹磺酰氯、苯甲酰氯、苯磺酰氯及熒光胺類等。
自從1979年Redmond和Tseng采用苯甲酰化的方法一來,色譜工作者對此進行了不斷地改進,已近成為較為成熟的檢測植物體內多胺的方法。然而在許多細節方面,如反應的時間、副反應的干擾、樣品的保存及分離條件的進一步優化等還有很多工作要做。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析
質譜條件:
流動相 | 甲醇-水(體積比60:40) |
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柱溫 | 30℃ |
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檢測波長 | 230nm |
流動相流速 | 0.7ml/min-1 |
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測定結果: