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液相色譜法測定血清甘油三酯的研究
液相色譜法測定血清甘油三酯的研究
血清甘油三酯是血脂的一個重要指標。目前在醫學檢驗中較普遍的采用酶法對其進行測定,此法的缺點是測定地結果實際上是總甘油的含量,包括游離甘油、甘油一酯、甘油二酯和TG,其中zui主要的是游離甘油對TG含量的干擾。目前上上沒有*的血清TG測定的標準方法,美國疾病控制與預防中心的內部參考方法是化學分析法,采用的是Carlson和Wadstrom、Van Hande和Zilvesmit及Lofland的方法和技術,該法特異性好,但操作復雜,技術要求高。至于同位素稀釋/氣相色譜/質譜法,測定費用昂貴,樣品處理復雜,難以推廣喲、應用。
鑒于以上情況,筆者對液相色譜法測定血清TG進行了璽致煙酒,建立了特異、且較簡單的測定方法。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析
樣品處理:
取樣品制備中的正己烷層直接進樣,總甘油測定進樣體及為5μl,測定游離甘油時為10μl。將標準溶液的濃度對甘油峰面積比進行線性回歸,得回歸方程,用于樣品甘油濃度計算。
質譜條件:
流動相 | 異丙醇:乙腈:正己烷=1%:0.5%:98.5% |
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柱溫 | 室溫 |
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檢測波長 | 230nm |
流量 | 1.2ml/min |
測定結果: