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離子交換色譜對抗VEGFR2單抗的電荷異質性分析
閱讀：1106 發布時間：2017-6-19
單克隆抗體有兩條重鏈兩條輕鏈組成，相對分子質量高達150000左右，結構復雜。在單抗制品的生產和儲存過程中會發生復雜的翻譯后修飾而導致巨大的異質性，其中電荷異質性對單抗的穩定性及其生物學功能發揮具有重要的影響而成為關鍵質量屬性，并且電荷異質性可反映其生產工藝的穩定性，所以受到生物技術產業界及監管機構密切關注。
單抗C末端賴氨酸的不均一性、甲硫氨酸氧化、天冬氨酸轉變為丁二酰亞胺等可能使單抗產生堿性變異體峰，其中C末端賴氨酸的不均一性zui為常見且有一定比例；N-糖末端的唾液酸化修飾、氨基酸殘基的脫酰胺等可使單抗產生酸性變異體峰，其中N-糖末端的唾液酸化修飾較常見，尤其對于鼠源性雜交瘤細胞系如NSO何SP2/2細胞所表達的單抗而言其比例一般較高。幾乎所有這些翻譯后修飾均可改變單抗的表面電荷分布特性，所以離子交換液相色譜可有效對單抗的電荷異質性進行分析。
研究利用離子交換搞笑液相色譜分析了一種VEGF2單抗的電荷異質性，并結合羧肽酶B和N-糖酰胺酶F2種酶切對此抗體電荷異質性形成的原因進行了初步研究