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用壓力泵實時檢測細胞增殖(培養)

閱讀:558        發布時間:2022-11-18

用壓力泵實時檢測細胞增殖(培養)

這是微納立方第28篇微流控推文

 

咱做細胞增殖檢測,有計數法、染色法……但很多方法都只能檢測一個時間點,就是說只能看到細胞增殖的結果,而不清楚過程,并且往往需要額外的儀器和試劑。這次和你分享一個不一樣的視角,用壓力泵去實時檢測細胞增殖,這個實驗由康比涅技術大學 (UTC)的一個生物工程實驗室完成。

 

實驗比較簡單:用1個壓力泵往1塊細胞培養芯片里泵入培養基(5組采用同款芯片,且均含流量計)。

老規矩,咱先來看一組實驗數據,下圖里的縱坐標是壓力泵的輸出壓力,橫坐標是芯片里的細胞數。


圖里值得說的是3個顏色區域的點:

綠色點位,設置恒定流量10μL/min,這時微流控芯片里還沒有細胞。

藍色點位,芯片里有細胞貼壁了,恒流模式使得所需壓力增大。

紅色點位,養了3天的細胞,細胞增殖數目變多,恒流所需壓力更大。

圖中藍色虛線是擬合出的壓力和細胞數的線性函數——到這你可能看不下去了,就這么點數據還擬合函數?有沒有點數學常識?但事實上,這個函數的樣子,正好符合了數學公式:微流控芯片里流道的流量=壓力/流阻(Q=△P/R),Q表示流量,△P表示壓力,R表示流阻。

如果細胞正常增殖,細胞數增多了,會造成芯片內流道變窄,肯定會導致流阻變大(流阻R與h^3*w成反比,h和w分別為芯片流道道的高和寬,點這看流阻是怎么計算的),為了滿足咱設定的10μL/min的流量,壓力泵的輸出壓力一定會增大。就是說,恒流模式下,細胞正常增殖,流阻變大,壓力泵輸出壓力就應該變大,如果壓力不變或者縮小(細胞被沖走),反而是問題。

所以重要的不是擬合出什么樣的函數,而是這個函數要符合壓力和細胞數的正相關關系,就是說這個函數上某個點的斜率,一定得是正的,不然細胞增殖就有問題。也許在你的實驗里,它就變成了個指數函數(有點夸張了,如果壓力像指數函數那樣增加,一定是發生堵塞了)。

你可能覺得檢測要精準,不能這樣看大概,但做一次細胞增殖(培養)動不動就好幾天,等做完才發現問題,浪費時間還耽誤進度,而這個辦法,只需要你看一眼壓力泵的輸出壓力。就像是如果你發燒了,一定要去醫院讓醫生來告訴你嗎?自己摸摸額頭也能知道。

P.s. 以上說的細胞增殖為理想情況,如果染菌,菌類生長也會讓壓力變大。

 

最后附上這個實驗的配置:法國Fluigent的壓力泵Flow EZ和流量計,加細胞培養芯片、細胞系和培養基,以及連接配件。


 

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如何計算微流控系統里的流阻?

 

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